詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013505 |
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對照,6個(gè)用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
Phospho-LAT (Tyr171) /FITC 熒光標(biāo)記磷化T細(xì)胞活化連接蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SPHK1/FITC 熒光標(biāo)記鞘氨醇激1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AIFM3 凋亡誘導(dǎo)因子3抗體 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
Glycoprotein VI 糖蛋白VI/六糖蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
SPHK1/FITC 熒光標(biāo)記鞘氨醇激1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
VD3(Human Vitamin D3) ELISA kit 人D3Multi-class antibodies: 48T
PLGF 胎盤生長因子抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HES1 轉(zhuǎn)錄因子HES-1抗體 0.2ml
Fbg ELISA Kit 大鼠血纖蛋白原 96T
PRRSV 豬藍(lán)耳病病毒抗體 1ml
CDH23 鈣粘蛋白23抗體 0.1ml
PLGF 胎盤生長因子抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit Mink IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
GABPA GA結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子α/GABP-α抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Arginase 1 精1抗體 0.2ml
IL-1 Alpha /FITC 熒光標(biāo)記白介1α抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Mink IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
Polycystin 1/FITC 熒光標(biāo)記多囊腎蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
枯草芽孢桿菌PCR試劑盒50次鼠李糖乳桿菌種屬: Lactobacillus│rhamnosus分離基物: 成人糞便提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抑制結(jié)腸紊亂;產(chǎn)生;用于益生菌類保健食品。培養(yǎng)基: CM0006生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
哈維氏弧菌種屬: Vibrio harveyi分離基物: 哈維氏弧菌菌株BB120提供形式: 凍干粉安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 哈維氏弧菌 BB-170
培養(yǎng)基: Marine Agar 2216 :蛋白棟 5.00 g ,酵母粉 1.00 g ,F(xiàn)e(III) citrate 0.10 g ,NaCl 19.45 g, 無MgCl2 5.90 g ,Na2SO4 3.24 g, CaCl2 1.80 g ,KCl 0.55 g, NaHCO3 0.16 g, KBr 0.08 g ,SrCl2 34.00 mg ,H3BO3 22.00 mg, Na-silicate 4.00 mg ,NaF 2.40 mg, (NH4)NO3 1.60 mg ,Na2HPO4 8.00 mg, 蒸餾 1000.00 ml, pH 7.6 ± 0.2生長條件: 30℃,好氧
玫瑰小雙孢菌玫瑰亞種種屬: Microbispora│rosea subsp. rosea提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain of M. parva培養(yǎng)基: 0039生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
埃塞俄比亞涅斯特連科氏菌種屬: Nesterenkonia│aethiopica分離基物: 生物樣/污染的羽毛(soiled feather sample)提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 471生長條件: 28-30存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒1-溴-4-丁 98%鉑炭催化劑 Pt 5%卡枯
骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒1-溴-5-戊 97%海綿鈀 99.95% metals basisL-細(xì)辛脂(標(biāo)準(zhǔn)品)
骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒1-溴-6-己 98%鉑黑 鉑含量,>99.9%,粒徑10 nm吉托皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)
骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒環(huán)戊烯 96%鈀碳 5%Pd;亞環(huán)已酮
骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒環(huán)戊烯 GCS,≥99.5% (GC) 硝銠溶液 10 % 溶液異甘草
骨成型蛋白15(BMP-15/GDF-9B)ELISA試劑盒環(huán)戊烯 98%硝銠溶液 5 % 溶液異甘草(標(biāo)準(zhǔn)品)
骨保(OPG)ELISA試劑盒溴代環(huán)戊 99%釕粉 99.9% metals basis人參皂苷Re(標(biāo)準(zhǔn)品)
骨保護(hù)(OPG)ELISA試劑盒, 含穩(wěn)定劑銅, 97%釕粉 99.99% metals basis人參皂苷F4,人參皂苷Rg4
谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移pi基因(GSTpi)ELISA試劑盒3--1- 98%三化銠,合 Rh 38.5-42.5% 人參皂苷RK3(標(biāo)準(zhǔn)品)
谷胱甘肽還原(GR)ELISA試劑盒環(huán)己烯 ≥99.0% (GC)銠 99.9%人參皂苷RH4
谷胱甘肽過氧化物(GSH-Px)ELISA試劑盒環(huán)己烯 CP,98.0% 銠黑 99.9% metals basis棗仁皂苷B1(標(biāo)準(zhǔn)品)
谷胱甘肽過氧化(GSH-Px)ELISA試劑盒庚二 99%銠碳催化劑 銠含量 (wt%) ,5%薯蕷次皂苷A
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移TT(GSTπ)ELISA試劑盒鞣花 96%氧化釕 99.9% metals basisRocilinostat (ACY-1215)
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移(GSTs)ELISA試劑盒沒食子,一物 AR,98.5%氧化釕(IV) 合物 釕含量75%肉豆蔻,十四(標(biāo)準(zhǔn)品)
谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒沒食子,一物 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(HPLC)氧化銠,無 99.8% metals basis,Rh 81%肉豆蔻,十四
谷氨脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)ELISA試劑盒沒食子甲酯 98%辛銠(II)二聚體 銠含量:26.5% 銅試劑;二乙基二硫代氨鈉,DDTC鈉鹽
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。