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馬、驢源性核酸檢測(cè)試劑盒48T0.1PCR管

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更新時(shí)間:2022-04-12 21:35:19瀏覽次數(shù):203

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 48T 0.1PCR管
貨號(hào) FS-02R6399 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
馬、驢源性核酸檢測(cè)試劑盒48T0.1PCR管正在出售的產(chǎn)品:無毒環(huán)保蘇木素-伊紅(H-E)染液規(guī)格:25ml×4
快速瑞氏染液規(guī)格:30ml×1、60ml×1
革蘭氏染液規(guī)格:50ml×4

詳細(xì)介紹

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

馬、驢源性核酸檢測(cè)試劑盒48T0.1PCR管

48T  0.1PCR管

FS-02R6399

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。

QQ截圖20201022162313.png 

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。

2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,

多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),

一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。

ADRA1A ELISA Kit 大鼠腎上腺能a1A受體Multi-class antibodies: 48T

 TOP2 alpha DNA拓普西異構(gòu)ⅡA抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh GLP-1 胰高血糖樣肽-1抗體  0.1ml

Beta-EP(human Beta-Endorphin) ELISA Kit 人β內(nèi)啡肽 96T

NEK2 中心體相關(guān)蛋白激Nek2抗體 0.2ml

beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉樣肽 1-40(C端)抗體 0.1ml

 TOP2 alpha DNA拓普西異構(gòu)ⅡA抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

TIMP-4(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4Multi-class antibodies: 48T

 Phospho-HP1(Tyr43) 異染色質(zhì)蛋白1磷化抗體(果蠅)Multi-class antibodies: 1ml

Rhesus antibody Rh Mcl1/BCL2L3 髓樣分化蛋白2抗體  0.1ml

Syk(Human spleen tyrosine kinase) ELISA Kit 人脾臟酪激 96T

RHCE Rh血型C抗原抗體 0.2ml

C1orf150 1號(hào)染色體開放閱讀框150抗體 0.2ml

 Phospho-HP1(Tyr43) 異染色質(zhì)蛋白1磷化抗體(果蠅)Multi-class antibodies: 1ml

Rabbit  Goat IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1ml

GPR105 G蛋白偶聯(lián)受體105抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ADORA1/Adenosine A1 Receptor 腺苷A1受體抗體  0.1ml

 LIX1/FITC 熒光標(biāo)記LIX1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Dog IgG whole serum 兔抗狗IgG抗血清  1ml

 Phospho-Syk (Tyr323) /FITC 熒光標(biāo)記磷化非受體型酪蛋白激抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
馬、驢源性核酸檢測(cè)試劑盒48T0.1PCR管Tetrahydrofuran

百部(直立百部)Stemona?(Stemona)

甲醇Methanol

千年健Homalomena

紅曲(特殊發(fā)酵)Monascus?(special?fermentation)

丙交沙霉Josamycin propionate

妥布霉Tobramycin

去甲萬古霉Norvancomycin

磷霉Fosfomycin

磺芐西林Sulbenicillin

卷曲霉Capreomycin

吉它霉Kitasamycin

克拉霉Clarithromycin

大觀霉Spectinomycin

萬古霉Vancomycin


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