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創(chuàng)傷弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-14 11:04:43瀏覽次數(shù):202

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號(hào) FS-P013439 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
創(chuàng)傷弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:益母草堿CAS:24697-74-3腫瘤干細(xì)胞熒光定性檢測(cè)試劑盒
485-47-2茚三酮?jiǎng)游锔涡菭罴?xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒
海神弧菌動(dòng)物肝細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒
人肝癌細(xì)胞;HepG2品牌動(dòng)物新生心肌細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒

詳細(xì)介紹

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

創(chuàng)傷弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒

50次

FS-P013439

 

QQ截圖20201022162313.png 

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。

2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,

多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),

一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

MT/MLT (Rat Melatonin,MT/MLT) ELISA Kit 大鼠褪黑Multi-class antibodies: 48T

 STAT6 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat  human IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗人IgG  0.1ml

AMA(Mouse  myocardial antibody) ELISA Kit 小鼠抗心肌抗體 96T

NUP54 NUP54抗體 0.2ml

Phospho-BRCA1 (Ser1189) 磷化癌易感基因1抗體 0.1ml

 STAT6 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

LP Ab-IgA(Human Legionella antibody IgA) ELISA Kit 人軍團(tuán)菌抗體IgAMulti-class antibodies: 48T

 Klf4 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh LASS4 長(zhǎng)壽相關(guān)基因lASS4抗體  0.2ml

AChRab(Human acetylcholine receptor antibody) ELISA Kit 人乙酰膽受體抗體 96T

PTPIP51 蛋白酪磷相互作用蛋白51抗體 0.2ml

CCDCNL 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白NL抗體 0.2ml

 Klf4 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rabbit  rat IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml

GSTCD 硫轉(zhuǎn)移C段結(jié)構(gòu)域抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh APH1a 早老γ分泌抗體  0.2ml

 IL-14/Taxilin alpha/FITC 熒光標(biāo)記抗白介14抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human sIgA/APC APC標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA  0.1ml

 PTN/FITC 熒光標(biāo)記多效生長(zhǎng)因子抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
創(chuàng)傷弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒爪哇根霉種屬: RhizopusjavanicusTakada安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 糖化菌培養(yǎng)基: 17,50生長(zhǎng)條件: 28-30℃

紫色鏈霉菌種屬: Streptomyces│violaceus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

解淀粉類芽孢桿菌種屬: Paenibacillus│amylolyticus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

季也蒙畢赤酵母種屬: Pichia│guilliermondii提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

(ALD)ELISA試劑盒辛乙酯 natural, ≥98%, FCC甲基柏木酮 鹽

固酮(ALD)ELISA試劑盒戊乙酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.7% (GC)5-甲基-2-己酮 99%鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)

全段甲狀旁腺(i-PTH)ELISA試劑盒戊乙酯 ≥98%, FG4-甲 99%馬來氟伏沙明

去乙?;?/span>Sirtuin-7(SIRT7/SIR2L7)ELISA試劑盒香葉  97%4-甲 ≥99%, FCC, Kosher馬來氟伏沙明(標(biāo)準(zhǔn)品)

去乙酰化Sirtuin-6(SIRT6/SIR2L6)ELISA試劑盒乙香葉酯 96%麥芽酚 99%福美斯坦

去乙?;?/span>Sirtuin-5(SIRT5/SIR2L5)ELISA試劑盒乙葉酯 98%麥芽酚 99%,FCC,FG福美斯坦(標(biāo)準(zhǔn)品)

去乙?;?/span>Sirtuin-4(SIRT4/SIR2L4)ELISA試劑盒正己 Standard for GC,>99.5%(GC)二氫酮甲酯 96%福辛普利鈉

去乙酰化Sirtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)ELISA試劑盒正己 98%對(duì)甲氧基甲 98%呋塞米(速尿)

去乙?;?/span>Sirtuin-1(SIRT1/SIR2L1)ELISA試劑盒正己 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.8%(GC)庚炔羧甲酯 ≥99%, FCC, Kosher, FG呋塞米(標(biāo)準(zhǔn)品)

去乙酰化饑餓(dGHRL)ELISA試劑盒正己 99%庚炔羧甲酯 98%氫加蘭他敏

去唾液糖蛋白受體(ASGPR)ELISA試劑盒正庚 Standard for GC甲酯 99%吉非羅齊

去唾液糖蛋白受體(AGSPR)ELISA試劑盒正庚 AR,98.0%甲酯 ≥98%, FCC,FG吉非羅齊(標(biāo)準(zhǔn)品)

去甲腎上腺(NE)ELISA試劑盒正庚 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-甲基丁基乙酯 99齊特

去甲腎上腺(NA)ELISA試劑盒正己 Standard for GC, ≥99.5% (GC)2-甲基-1-基-2- 99%特(標(biāo)準(zhǔn)品)

去氨加壓/1-去氨基-8-右旋-精氨加壓(dDAVP)ELISA試劑盒正己 CP,98.0%        2-壬炔甲酯 98%格列本脲

趨化因子受體3(CCR3)ELISA試劑盒正己 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-壬炔甲酯 Kosher, ≥99%格列本脲(標(biāo)準(zhǔn)品)
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。


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