詳細介紹
參數規(guī)格:
產品名稱:副豬嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
產品貨號:FS-P013425
產品規(guī)格: 50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
LIR-6/CD85i/LILRA1/FITC 熒光標記白細胞球蛋白樣受體6抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SUMO/FITC 熒光標記類泛蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADRB1 腎上腺能受體β1抗體 0.1ml
Rabbit Goat IgM/AP 性磷(AP)標記的兔抗羊IgM 0.1ml
GRIK5 谷受體紅藻離子5抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗狗IgG 0.1ml
SUMO/FITC 熒光標記類泛蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
AD(Human amiodarone) ELISA Kit 人乙胺碘呋酮Multi-class antibodies: 48T
PEG3 PEG3蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HIV gp41 艾滋病病毒抗體 0.2ml
BMP-7 ELISA Kit (Rabbit) 兔骨成型蛋白7 96T
Pumilio 2 PUM2蛋白抗體 0.2ml
CNOT6 細胞表面趨化因子受體4相關蛋白6抗體 0.2ml
PEG3 PEG3蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit rat IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GIMAP4 GTPIMAP家族成員4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APC5 細胞分裂周期蛋白5抗體 0.2ml
IL-17RB/FITC 熒光標記白介-17B受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/Gold 膠體金標記的兔抗人IgM 0.5ml
RAD51C/FITC 熒光標記癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
副豬嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產生代謝產物具有抑菌活性培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
赭褐鏈霉菌種屬: Streptomyces│umbrinus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產生代謝產物具有抑菌活性培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 定期移植法
普通鏈霉菌種屬: Streptomyces│vulgaris提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0091生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
紅曲霉種屬: Monascus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 法葡萄糖。培養(yǎng)基: 0013生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
性成纖維生長因子(aFGF/FGF-1)ELISA試劑盒三乙酰 98%氨茶 98%度他雄(標準品)
性成纖維生長因子(aFGF)ELISA試劑盒特戊酰 98%氨茶 藥用級依達拉奉
松弛肽/松弛(RLN)ELISA試劑盒正戊酰 98%茶 藥典BP級依達拉奉(標準品)
松弛(RLN)ELISA試劑盒 AR,98%茶 無, ≥99%, 粉末氫化奎寧定;雙氫奎尼丁
四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒 GCS, ≥99.5% (GC) 1-乙酰咪唑 99%鹽依匹斯汀
四連接(CLEC3B)ELISA試劑盒 GR,99%1,2-二甲基咪唑 99%鹽依匹斯汀(標準品)
死亡相關蛋白1(DAP/DAP1)ELISA試劑盒 分析標準品癸二二辛酯 AR,97.0%依普利酮
絲狀血球凝集(FHA)ELISA試劑盒碳化 1-200目,98%馬來二丁酯 97%依普利酮(標準品)
絲裂原激活的蛋白激/MAP激(MAPK)ELISA試劑盒碳化 1-10 μm,98%癸二二丁酯 98%戊雌二
絲裂原活化蛋白激激6(MKK6)ELISA試劑盒碳化 99%,50nm2-辛酮 98%戊雌二
絲裂原活化蛋白激(MAPK)ELISA試劑盒1,3,3-基-2-亞甲基吲哚啉 98.5%,用于紙層析仲辛 AR,98%依替膦鈉
絲氨肽2甘露聚糖結合凝集(MASP2)ELISA試劑盒1,3,3-基-2-亞甲基吲哚啉 97%仲辛 CP,97%*度
絲氨蛋白抑制因子肽抑制因子進化枝3G(Serpina3g)ELISA試劑盒氮化 1 μm, 98.5%仲辛 Standard for GC,≥99.5% (GC)*度(標準品)
絲氨蛋白HTRA1(HTRA1)ELISA試劑盒碳化硅 99%,0.5~0.7um仲辛 ≥99% (GC)*孕烯
絲氨蛋白(PRSS)ELISA試劑盒化鈦 98%,4 ~ 8μm仲辛 ≥98%,FG依維莫司
絲氨/蘇氨激24(STK24)ELISA試劑盒碳化鈦 99%,2-4μm硫鉍 CP,98.0%醋氟輕松;醋膚輕松
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。