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詳細介紹
參數規(guī)格：
產品貨號：FS-02R6471
產品規(guī)格：48T
產品分類：水產養(yǎng)殖病害檢測系列（恒溫熒光法）
產品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
OVA sIgE ELISA Kit 大鼠卵清蛋白特異性IgEMulti-class antibodies： 48T
TRF2 端粒結合蛋白2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GIMAP7 GTPIMAP家族成員7抗體 0.2ml
OLAb ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白抗體 96T
Neuro D2 神經細胞分化因子2抗體 0.2ml
Azurocidin 肝結合蛋白/陽離子蛋白37/天青殺抗體 0.2ml
TRF2 端粒結合蛋白2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Human Cyclin-D3 ELISA Kit 人細胞周期D3Multi-class antibodies： 48T
HIV-1 ENV (gp160) 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MDGA2 神經元膜糖蛋白錨定蛋白2抗體 0.2ml
ALP(Human alkaline phosphatase) ELISA Kit 人性磷 96T
RNF111 環(huán)指蛋白111抗體 0.2ml
phospho-alpha B Crystallin (Ser19) 磷化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 0.1ml
HIV-1 ENV (gp160) 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit chicken IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗雞IgM 0.1ml
phospho-GABBR1 (Ser923) 磷化gamma基丁B型受體1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ADAM9 去整合樣金屬蛋白9抗體 0.2ml
Phospho-MAP2 (Ser136) /FITC 熒光標記磷化微管相關蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bovine IgM/Gold 膠體金標記的兔抗IgM 2ml
T7 tag/HRP 辣根過氧化物標記T7 tag標簽抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
對蝦血細胞虹彩病毒（ SHIV）PCR檢測試劑盒飲料阿斯巴塘（aspartame）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次小鼠腦腸肽elisa檢測試劑盒
糖果阿斯巴塘（aspartame）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠雌三醇elisa檢測試劑盒
食物阿斯巴塘（aspartame）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠血栓B2elisa檢測試劑盒
藥品阿斯巴塘（aspartame）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠髓磷脂性蛋白elisa檢測試劑盒
化妝品阿斯巴塘（aspartame）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠糖原合成elisa檢測試劑盒
咖啡阿斯巴塘（aspartame）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠抗胰蛋白elisa檢測試劑盒
飲料乙酰舒泛（acesulfame K）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠顆粒Belisa檢測試劑盒
糖果乙酰舒泛（acesulfame K）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次小鼠轉化生長因子β2elisa檢測試劑盒
食物乙酰舒泛（acesulfame K）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠乙酰膽elisa檢測試劑盒
藥品乙酰舒泛（acesulfame K）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次小鼠白介23elisa檢測試劑盒
化妝品乙酰舒泛（acesulfame K）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰelisa檢測試劑盒
咖啡乙酰舒泛（acesulfame K）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次小鼠補體因子Helisa檢測試劑盒
飲料三蔗糖（sucralose）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠前列腺性磷elisa檢測試劑盒
糖果三蔗糖（sucralose）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次小鼠環(huán)磷鳥苷elisa檢測試劑盒
食物三蔗糖（sucralose）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠組織多肽抗原elisa檢測試劑盒
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