詳細介紹
中文名稱:細胞凋亡檢測試劑盒I(POD)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:20T
發(fā)貨周期:1~3天
工作原理: 在機體內(nèi)部隨時都在發(fā)生著細胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細胞的死亡,其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活,細胞自身的染色質(zhì)或DNA被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產(chǎn)生與 DNA 斷點數(shù)目相同的3’-OH末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標記的dUTP(DIG-dUTP)標記至 3’-OH末端,DIG-dUTP結(jié)合在DNA斷點部位,可以通過生物標記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應后,再結(jié)合鏈酶親和素-過氧化物酶(SABC),然后加入顯色底物DAB予以顯示。凋亡的細包核呈黃色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。 |
試劑盒內(nèi)容:
1.標記緩沖液(Labeling Buffer)1ml
2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl
3.DIG-dUTP(×20)20μl
4.封閉液(Blocking Reagent)4ml
5.生物化抗抗體(× 100)20μl
6.SABC(× 100)20μl
7.Proteinase K(×200)50μl
8.抗體稀釋液 4ml
保存條件:-20℃冰凍保存。
保存期:一年
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
基質(zhì)金屬蛋白10(MMP10)elisa試劑盒英文名稱:MMP10 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框59抗體包裝5MG
基質(zhì)金屬蛋白1(MMP1)elisa試劑盒英文名稱:MMP1 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框64抗體包裝250mg
肌原纖蛋白1(FBN1)elisa試劑盒英文名稱:FBN1 ELISA Kit8號染色體開放閱讀框12抗體包裝1g
肌營養(yǎng)不良蛋白關(guān)聯(lián)糖蛋白1(DAG1)elisa試劑盒英文名稱:DAG1 ELISA Kit8號染色體開放閱讀框31抗體包裝250mg
肌營養(yǎng)不良蛋白(DMD)elisa試劑盒英文名稱:DMD ELISA Kit8號染色體開放閱讀框33抗體包裝5g
肌細胞生成(MYOG)elisa試劑盒英文名稱:MYOG ELISA KitⅡ型膠原蛋白抗體包裝100g
肌微管相關(guān)蛋白9(MTMR9)elisa試劑盒英文名稱:MTMR9 ELISA Kit軟骨蛋白1抗體包裝25g
肌肽合1(CARNS1)elisa試劑盒英文名稱:CARNS1 ELISA Kit顱面部發(fā)育蛋白1抗體包裝500g
肌激MB同工(CKMB)elisa試劑盒英文名稱:CKMB ELISA Kit肥大羧肽A3抗體包裝1g
肌肉生長抑制(MSTN)elisa試劑盒英文名稱:MSTN ELISA Kit1號染色體開放閱讀框105抗體包裝250mg
肌球蛋白重鏈4(MYH4)elisa試劑盒英文名稱:MYH4 ELISA KitⅠ型補體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)包裝5g
肌球蛋白重鏈2(MYH2)elisa試劑盒英文名稱:MYH2 ELISA Kit趨化樣因子受體1抗體包裝1g
肌球蛋白重鏈1(MYH1)elisa試劑盒英文名稱:MYH1 ELISA Kit趨化樣因子受體1抗體包裝1g
肌球蛋白ⅤA(MYO5A)elisa試劑盒英文名稱:MYO5A ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝1g
肌球蛋白ⅠA(MYO1A)elisa試劑盒英文名稱:MYO1A ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝250mg
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品整合αM型試劑盒魚藤酮;Rotenone
東京根霉Rhizopus│tonkinensis 質(zhì)量規(guī)格:進分Sigma P4394 整合αⅤβ3試劑盒異銀杏雙黃酮;Isoginkgetin
云芝栓孔菌Trametes│versicolor (L.) Lloyd 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,培養(yǎng)級,BR整合α4試劑盒異丁酰紫草;Isobutyrylshi
細胞凋亡檢測試劑盒I(POD)乙醛脫氫
其他醛脫氫
英文名稱:Aldehyde Dehydrogenase from baker's yeast
產(chǎn)品規(guī)格:生物技術(shù)級,1u/mg
包裝:25毫克
產(chǎn)品規(guī)格:BR,2u/mg
包裝:25U
CAS號:9028-88-0
級別:BioChemika
活力:≥1.0 units/mg solid
活力定義:1 U corresponds to the amount of enzyme which oxidizes 1 μmol acetaldehyde (Fluka No. 00070) to acetic acid per minute at pH 8.0 and 25 °C
級別:BR
PH穩(wěn)定性:5.0~10.0(30℃,20hr)
PH:8.0
熱穩(wěn)定性:<60℃(PH7.5,30min)
溫度:80℃
抑制劑:Ag+,Hg2+
Preparation instructions:The enzyme is reconstituted in 20mM potassium phosphate buffer,PH7.5 for activity assay
性狀:粉末,微生物提取。
用途:生化研究。甘油激催化甘油轉(zhuǎn)變成3-磷甘油。用于甘油和甘油三酯的檢測
保存:-20℃
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)