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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：豬細(xì)小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013593
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
KLK3/FITC 熒光標(biāo)記激肽釋放3/舒血管3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SLK/Fyn/FITC 熒光標(biāo)記酪蛋白激Fyn(同步原癌基因)抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALOXE3 表皮型脂氧合3抗體(魚鱗病相關(guān)蛋白) 0.2ml
Rabbit human IgM/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
GM2A 神經(jīng)鞘脂激活蛋白3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
SLK/Fyn/FITC 熒光標(biāo)記酪蛋白激Fyn(同步原癌基因)抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
HSP gp96(Human Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit 人熱休克蛋白糖蛋白96Multi-class antibodies： 48T
Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363) 磷化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HRG Beta1 Heregulin β蛋白抗體 0.1ml
EGF ELISA Kit 大鼠表皮生長因子 96T
PRKCDBP 蛋白激C delta結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
CKLFH1 趨化樣因子超家族成員1抗體 0.2ml
Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363) 磷化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Mouse human IgG(3D3)/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml
GPX7 谷胱甘肽過氧化7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AT1R/AGTR1 血管緊張Ⅱ-1型受體抗體 0.1ml
HPV16-E6/E6 protein/FITC 熒光標(biāo)記人類狀瘤病毒16抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
phospho-MK1/MAPKK1(pSer298)/FITC 熒光標(biāo)記抗磷化原活化蛋白激激1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
豬細(xì)小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒50次變形桿菌種屬: Proteus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: Kauffmann血清型 31 1培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
深海王祖農(nóng)菌種屬: Zunongwangia│profunda分離基物: 沉積物/柱狀樣（-2m）提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株；培養(yǎng)基: 472生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
安卡紅曲種屬: Monascus│anka提供形式: 斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 醬油、腐乳培養(yǎng)基: 17生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
破傷風(fēng)梭狀芽胞桿菌種屬: Clostridium│tetani提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0121生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
轉(zhuǎn)位因子蛋白(TSPO)ELISA試劑盒鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液2.0mg/l,分析標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)分析 三乙三氫氟鹽 97%十五氟辛(約5mmol)[離子對色譜級]
轉(zhuǎn)位蛋白(TSN)ELISA試劑盒鋅 CP，99%疊氮化四丁基銨 95%十五氟辛,高等級[離子對色譜級]
轉(zhuǎn)酮(TKT)ELISA試劑盒鋅粉 AR,99%十二基硫鈉 CP十三氟庚,高等級[離子對色譜級]
轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)ELISA試劑盒鋅 AR，99%十二基硫鈉 Ph. Eur，USP級，92%十一氟己,高等級[離子對色譜級]
轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)ELISA試劑盒鋅粉 SP十二基硫鈉 AR，92.5-100.5%9,10-二甲氧基蒽-2-磺鈉鹽[離子對色譜級]
轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)ELISA試劑盒鋅粒 SP十二基硫鈉 97%，電泳敵草隆(標(biāo)準(zhǔn)品)
轉(zhuǎn)縮(TALDO1)ELISA試劑盒對氨基乙 98%十二基硫鈉 99.0%，超純級1,4－二標(biāo)準(zhǔn)溶液
轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)ELISA試劑盒甲酰 98%十二基硫鈉 ACS茜紅
轉(zhuǎn)錄銜接因子3(TADA3)ELISA試劑盒2,4-二氟溴 98%十二基硫鈉 分子生物學(xué)級，≥98.5% (GC)茜黃GG
轉(zhuǎn)錄銜接因子1(TADA1)ELISA試劑盒2--6-氟 98%十二基硫鈉 離子對色譜級，≥99.0% (GC)茜黃R
轉(zhuǎn)錄激活因子7(ATF7)ELISA試劑盒3,5-二氟甲 97%橙花 97%鋁試劑,玫紅三羧銨
轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)ELISA試劑盒3-磺酰 97%丁位辛內(nèi)酯 98%鋁試劑
轉(zhuǎn)錄激活因子5(ATF5)ELISA試劑盒基乙烯基砜 99%3- 99%性鉻藍(lán)K
轉(zhuǎn)錄激活因子4(ATF4)ELISA試劑盒對叔丁 95%3- ≥98%, FCC性品紅
轉(zhuǎn)錄激活因子1(ATF1)ELISA試劑盒甲基烯三氟乙酯 包含 100 ppm MEHQ 穩(wěn)定劑,98%二甲基亞砜 for HPLC, ≥99.7%茜絡(luò)合指示劑(IND)
轉(zhuǎn)膠蛋白3(TAGLN3)ELISA試劑盒2,2,2-三氟乙 99.5%二氧化鈦 CP,98.0%茜絡(luò)合指示劑(高純級,98%)
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