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裸蓋魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

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更新時間:2022-04-13 10:31:13瀏覽次數(shù):223

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013385 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
裸蓋魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:SEK1/MKK4 (Phospho-Ser80) Antibody
ASK1 (Phospho-Ser83) Antibody
ASK1 (Phospho-Ser966) Antibody

詳細(xì)介紹

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

裸蓋魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

50次

FS-P013385

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

QQ截圖20201022162313.png 

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

IL-21 ELISA Kit 大鼠白介21Multi-class antibodies: 48T

 T3 三碘甲狀腺T3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat  Guinea pig IgG 羊抗豚鼠IgG  1mg

DR-70TM(Human tumor marker DR-70 for lung cancer) ELISA Kit 人肺癌標(biāo)志物DR-70 96T

NSG2 神經(jīng)元特異性蛋白家族成員2抗體 0.2ml

BMP9 骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體 0.2ml

 T3 三碘甲狀腺T3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

AMA(Human  myocardial antibody) ELISA Kit 人抗心肌抗體Multi-class antibodies: 48T

 IL-7 白介7抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh LPP/LIM protein 脂肪瘤相關(guān)蛋白抗體  0.1ml

PWM(Human pokeweed mitogen) ELISA Kit 人美洲商陸 96T

RAB7 RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB7抗體 0.1ml

C2orf42 2號染色體開放閱讀框42抗體 0.2ml

 IL-7 白介7抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rabbit  mouse IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

G protein alpha S G蛋白αS抗體(鳥核苷結(jié)合蛋白Gα s) 0.2ml

Rhesus antibody Rh ANKRD53 錨蛋白重復(fù)域53抗體  0.2ml

 Insulin/FITC 熒光標(biāo)記標(biāo)記胰島抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human IgG F(ab')2/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2  0.1ml

 RUNX1/AML1/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
裸蓋魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒蘇云金芽胞桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 1-5cm土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研研究培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法

燼灰鏈霉菌種屬: Streptomyces│cinereogrieus分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抑制陽性培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

戊糖片球菌種屬: Pediococcus│pentosaceus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0033生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法

金黑小單孢菌種屬: Micromonospora│auratinigra分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒N,N-二 standard for GC, ≥99.5% (GC)4-乙基甲 ≥97%達(dá)卡巴(標(biāo)準(zhǔn)品)

脂多糖/內(nèi)(LPS)ELISA試劑盒N-二亞甲基-甘氨叔丁酯 98%六氟乙酰酮 98%達(dá)沙替尼(無)

脂多糖(LPS)ELISA試劑盒3,3'-二氟二甲酮 99%3,4,5-三氟 97%達(dá)沙替尼(無)(標(biāo)準(zhǔn)品)

脂蛋白脂(LPL)ELISA試劑盒1,10-二氨基癸 97%3,4,5-三氟酚 98%達(dá)托霉

脂蛋白脂肪(LPL)ELISA試劑盒二鯨蠟酯 98%2-(2-溴乙基)-1,3-二惡 98%達(dá)托霉(標(biāo)準(zhǔn)品)

脂蛋白相關(guān)脂A2(Lp-PLA2)ELISA試劑盒順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-羥甲基-3,4-二氫吡喃 97%鹽柔紅霉

脂蛋白脂A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒二溴 分析標(biāo)準(zhǔn)品對羥基甲丁酯 99%鹽柔紅霉(標(biāo)準(zhǔn)品)

脂蛋白脂A2(Lp-PLA2)ELISA試劑盒薯蕷皂 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>95%尼泊金乙酯 AR,99%鹽柔紅霉(進(jìn)口)

脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒二甲氧 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8% (GC)乙二 98%地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷

脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA試劑盒烯 N,N-二乙基氨基乙酯 95%6-羥基-2-萘甲 98%地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷(標(biāo)準(zhǔn)品)

正常T表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒1,3-二羥基酮,二聚體 97%對羥基甲 99%5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷

整合連接激1(ILK-1)ELISA試劑盒2,2-二羥基偶氮 97%對羥基甲 ≥99%醋德舍瑞林

整合β4結(jié)合蛋白(ITGB4BP)ELISA試劑盒二十二碳六烯甲酯 98%4-羥基甲異丁酯 99%去氨加壓;去氨壓

整合αM型(ITG αM/CD11b)ELISA試劑盒二十二碳六烯甲酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%4-羥基甲異酯 99%莫匹羅星,假單胞菌

整合αⅤβ3(ITG αⅤβ3)ELISA試劑盒鄰二甲二丁酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品對羥基甲甲酯鈉 99%匹伐他汀叔丁酯

整合α4(ITGA4/CD49D)ELISA試劑盒2,4-二氧乙 分析標(biāo)準(zhǔn)品對羥基甲甲酯鈉 Ph Eur己烯雌酚()


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