操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:尼氏染色液(焦油紫法)
英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:3×100ml 發(fā)貨周期:1~3天 用途: 尼氏物質(zhì)、神經(jīng)元染色 注意事項(xiàng): 主要由焦油紫染色液、分化液等組成。尼氏物質(zhì)呈紫色背景接近于無色。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
異蓮心堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ethacrynic acidA型流感病-NS1抗體(神經(jīng)1)包裝5g
異綠原A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Maprotiline hydrochloride去腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)去腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體包裝250g
異綠原B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hydralazine hydrochloride磷化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)抗體包裝100ml
異綠原C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hydroxyzine dihydrochloride新的飽食分子蛋白抗體包裝25ml
異羅漢果皂苷 V英文名稱: Auranofin脊髓灰質(zhì)炎病受體相關(guān)蛋白4抗體包裝1g
異芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TERBUTALINE SULFATE性受體NK-p80抗體包裝25g
異牡荊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: MALTOTRIOSE粘附分子CD112抗體包裝5g
異南五味子木脂寧英文名稱: Procaterol HCl腎小球粘附分子受體抗體包裝250mg
異歐前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium D-pantothenate 成纖維核受體Nr5a2抗體包裝100g
異皮啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nintedanib (BIBF1120)鈉鈣交換蛋白1抗體包裝25g
異去蟛蜞菊內(nèi)酯英文名稱: Riboflavin-5-phosphate sodium鈉鈣交換蛋白3抗體包裝5g
異去氫鉤藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-(+)-Maltose monohydrate 天冬受體抗體包裝25g
異珊瑚菜英文名稱: Urea磷化核因子2相關(guān)因子2(Ser40)抗體包裝5g
異鼠李(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-BiotinNemo樣激抗體包裝25g
異鼠李-3-O-槐二糖-7-O-鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Terfenadine磷化Nemo樣激抗體包裝5g
黑沙假單胞菌Pseudomonas│sabulinigri 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR堿性成纖維生長因子試劑盒橙皮;Hesperetin
圈卷產(chǎn)色鏈霉菌淺色變種Streptomyces│ansochromogenes var. pallens 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品間皮試劑盒川陳皮;Naringin
地衣芽胞桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:>99%間變性淋巴瘤激試劑盒川續(xù)斷皂苷Ⅵ;Akebia saponi
尼氏染色液(焦油紫法)