詳細介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:增強型CCK-8試劑盒
英文名稱:Enhanced Cell Counting Kit-8
產品規(guī)格:100次|500次|2500次|10000次
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒是一種基于WST-8而廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒,比普通的CCK-8試劑盒具有更好的檢測靈敏度和更寬的線性范圍。 WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan(參考圖1)。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。 |
WST-8是MTT的一種升級替代產品,和MTT或其它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點。首先,MTT被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-8和XTT、MTS產生的formazan都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-8產生的formazan比XTT和MTS產生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加穩(wěn)定,使實驗結果更加穩(wěn)定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比線性范圍更寬,靈敏度更高。
WST-8和WST-1相比,檢測靈敏度更高,更易溶解,并且更加穩(wěn)定。
本試劑盒可以用于細胞因子等誘導的細胞增殖檢測,也可以用于抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測,或一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測。
本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經配制好的含有WST-8的增強型CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測。酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。
WST-8對細胞無明顯毒性。加入增強型CCK-8溶液顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀板,使檢測時間更加靈活,便于找到最佳測定時間。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
循環(huán)免疫復合物(CIC)elisa試劑盒英文名稱:CIC ELISA Kit錨蛋白重復結構域蛋白20A3抗體包裝500g
血小板因子4(PF-4/CXCL4)elisa試劑盒英文名稱:PF-4/CXCL4 ELISA Kit錨蛋白重復結構域蛋白22抗體包裝1g
血小板因子3(PF-3)elisa試劑盒英文名稱:PF-3 ELISA Kit錨蛋白重復結構域蛋白50抗體包裝1g
血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa試劑盒英文名稱:PDGFsR-α ELISA Kit氫離子轉運ATP合成酶6G抗體包裝5g
血小板衍生生長因子CC(PDGF-CC)elisa試劑盒英文名稱:PDGF-CC ELISA Kit錨蛋白重復結構域蛋白26抗體包裝5ml
血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)elisa試劑盒英文名稱:PDGF-BB ELISA Kit錨蛋白重復結構域蛋白26抗體包裝100mg
血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)elisa試劑盒英文名稱:PDGF-AB ELISA Kit型肝炎病核結合蛋白-1抗體包裝1g
血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)elisa試劑盒英文名稱:PDGF-AA ELISA Kit芳香基硫酸酯酶K抗體包裝100MG
血小板生長因子(PDGF)elisa試劑盒英文名稱:PDGF ELISA Kit神經元突觸前膜蛋白抗體包裝50MG
血小板生成素(TPO)elisa試劑盒英文名稱:TPO ELISA Kit錨定蛋白G抗體包裝25g
血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)elisa試劑盒英文名稱:GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61 ELISA Kit肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體包裝5g
血小板活化因子(PAF)elisa試劑盒英文名稱:PAF ELISA Kit整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型抗體包裝1g
血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)elisa試劑盒英文名稱:TSP-1 ELISA Kit整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體 (N端抗體)包裝250mg
血纖蛋白原降解產物(FDP)elisa試劑盒英文名稱:FDP ELISA Kit整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體包裝5g
血纖蛋白原γ鏈(FGG)elisa試劑盒英文名稱:FGG ELISA Kit內收蛋白抗體包裝250mg
磷酸化芳香N-乙酰化轉移酶抗體白介素2(IL2)XL413 hydrochloride 是一種有效的,選擇性的,ATP 競爭性的 Cdc7 抑制劑,IC50 值為 3.4 nM,同時對 CK2 和 PIM1
增強型CCK-8試劑盒紫杉醇
其他 漿果赤霉素III
英文名稱: Paclitaxel
其他英文名稱: 7,11-Methano-5H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]oxete benzenepropanoic acid deriv;Taxal;Taxol A
產品規(guī)格: 分析標準品,99%
包 裝: 10毫克/20毫克/100毫克/500毫克
CAS號:33069-62-4
C47H51NO14=853.92
級別:分析標準品
含量:≥99.0%
熔點:213~216℃
性狀:結晶粉末。
用途:生化研究。
保存:RT,避光