詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):菜豆莢斑駁病毒RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013389
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類(lèi):純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
LRIG2/FITC 熒光標(biāo)記抗LRIG2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SYVN1/FITC 熒光標(biāo)記滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Adenylate Kinase 1/AK1 腺苷激-1抗體 0.2ml
Rabbit dog IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
GYPB 血型糖蛋白δ抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗雞IgM 0.1ml
SYVN1/FITC 熒光標(biāo)記滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
AnuA-IgG(Human nucleosome antibody IgG) ELISA Kit 人抗核小體抗體IgGMulti-class antibodies: 48T
Integrin Alpha 3 + Beta 1 整合α3β1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Lipophilin B 親脂性蛋白B抗體 0.2ml
PSA(Human prostate specific antigen) ELISA Kit 人前列腺特異性抗原 96T
Rab5b RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab5B抗體 0.2ml
CCAP 心動(dòng)加速蛋白多肽抗體 0.2ml
Integrin Alpha 3 + Beta 1 整合α3β1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
phospho-GSK3 Beta (Tyr216) 磷化糖原合激3β抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKS1B/AIDA1 β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
Inhibin BetaA/FITC 熒光標(biāo)記抑制βA抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
ROS/FITC 熒光標(biāo)記活性氧簇ROS抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
菜豆莢斑駁病毒RT-PCR試劑盒肺炎克雷伯氏菌種屬: Klebsieela│pneumoniae分離基物: 禾本科牧草圓果雀稗根提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 0003生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
曲霉種屬: Aspergillus│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 311生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
居沉積物海桿菌種屬: Marinobacterium│sediminicola分離基物: 沉積物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 2216E海瓊脂生長(zhǎng)條件: 30℃,好氧,24h存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pantoeastewartiisubsp.stewartii種屬: Pantoeastewartiisubsp.stewartii安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28℃
誘導(dǎo)型一氧化合成(iNOS)ELISA試劑盒2,2'-二喹啉-4,4'-二羧 90%6-甲氧基-2-乙酰萘 98%氟比洛芬(進(jìn)口)
誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)ELISA試劑盒二三(1,10-鄰二氮雜菲)釕(Ⅱ),合 98%五化 CP,95.0%氟比洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品)
有絲分裂原活化蛋白激14(MAPK14)ELISA試劑盒2,6-二-3-(三氟甲基)吡啶 98%五化 AR,98.0霉鈣(溶)
游離脂肪(FFA)ELISA試劑盒1,3-二四甲基二硅氧 97%二乙酮 98%霉鈉
游離原卟啉(FEP)ELISA試劑盒2,3-二甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析五化 99.998% metals basis加替沙星
游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒2,5-二甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品鄰二甲 99%加替沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)
游離狀腺原氨(Free-T3)ELISA試劑盒3,4-二 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-甲基噻吩 99%吉非替尼
游離肉(Free Carnitine)ELISA試劑盒2,2'-二硫雙(4-甲基噻唑) 97%噻吩-2-乙 98%吉非替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)
游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒地美環(huán)鹽鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙酰氧肟 98%鹽吉西他濱
游離甲狀腺(FT4)ELISA試劑盒地美環(huán)鹽鹽 ≥90% (HPLC)雙(2-乙基)鹽鹽 98%鹽吉西他濱(標(biāo)準(zhǔn)品)
游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯乙酯 90%羧甲氧基半鹽鹽 98%甲磺吉米沙星
游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯乙酯 99%楊羥肟 99%甲磺吉米沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)
游離雌三(FE3)ELISA試劑盒6,7-二羥基 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%二甲基二硅 CP,掃尾劑膽鈉
游離β絨毛膜促性腺(f-βhCG)ELISA試劑盒四丁基氫氧化銨,30 98%二甲基二硅 >98.5%(GC)醋胰高血糖
幽門(mén)螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒p, p’-DDE 分析標(biāo)準(zhǔn)品亞麻乙酯 80%,天然醋戈那瑞林
幽門(mén)螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒2,4-滴異辛酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品亞麻乙酯 98%鹽格拉司瓊
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。