詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:菜豆莢斑駁病毒RT-PCR試劑盒
產品貨號:FS-P013389
產品規(guī)格: 50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
LRIG2/FITC 熒光標記抗LRIG2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SYVN1/FITC 熒光標記滑膜細胞凋亡抑制物1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Adenylate Kinase 1/AK1 腺苷激-1抗體 0.2ml
Rabbit dog IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗狗IgG 0.1ml
GYPB 血型糖蛋白δ抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgM/APC APC標記的兔抗雞IgM 0.1ml
SYVN1/FITC 熒光標記滑膜細胞凋亡抑制物1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
AnuA-IgG(Human nucleosome antibody IgG) ELISA Kit 人抗核小體抗體IgGMulti-class antibodies: 48T
Integrin Alpha 3 + Beta 1 整合α3β1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Lipophilin B 親脂性蛋白B抗體 0.2ml
PSA(Human prostate specific antigen) ELISA Kit 人前列腺特異性抗原 96T
Rab5b RAS相關蛋白Rab5B抗體 0.2ml
CCAP 心動加速蛋白多肽抗體 0.2ml
Integrin Alpha 3 + Beta 1 整合α3β1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse IgG/APC APC標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
phospho-GSK3 Beta (Tyr216) 磷化糖原合激3β抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKS1B/AIDA1 β淀粉樣蛋白胞內結構域相關蛋白1抗體 0.2ml
Inhibin BetaA/FITC 熒光標記抑制βA抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗人IgG 0.1ml
ROS/FITC 熒光標記活性氧簇ROS抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
菜豆莢斑駁病毒RT-PCR試劑盒肺炎克雷伯氏菌種屬: Klebsieela│pneumoniae分離基物: 禾本科牧草圓果雀稗根提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 研究培養(yǎng)基: 0003生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
曲霉種屬: Aspergillus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 311生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
居沉積物海桿菌種屬: Marinobacterium│sediminicola分離基物: 沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 2216E海瓊脂生長條件: 30℃,好氧,24h存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Pantoeastewartiisubsp.stewartii種屬: Pantoeastewartiisubsp.stewartii安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃
誘導型一氧化合成(iNOS)ELISA試劑盒2,2'-二喹啉-4,4'-二羧 90%6-甲氧基-2-乙酰萘 98%氟比洛芬(進口)
誘導型一氧化氮合成(iNOS)ELISA試劑盒二三(1,10-鄰二氮雜菲)釕(Ⅱ),合 98%五化 CP,95.0%氟比洛芬(標準品)
有絲分裂原活化蛋白激14(MAPK14)ELISA試劑盒2,6-二-3-(三氟甲基)吡啶 98%五化 AR,98.0霉鈣(溶)
游離脂肪(FFA)ELISA試劑盒1,3-二四甲基二硅氧 97%二乙酮 98%霉鈉
游離原卟啉(FEP)ELISA試劑盒2,3-二甲 分析標準品,用于環(huán)境分析五化 99.998% metals basis加替沙星
游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒2,5-二甲 分析標準品鄰二甲 99%加替沙星(標準品)
游離狀腺原氨(Free-T3)ELISA試劑盒3,4-二 分析標準品2-甲基噻吩 99%吉非替尼
游離肉(Free Carnitine)ELISA試劑盒2,2'-二硫雙(4-甲基噻唑) 97%噻吩-2-乙 98%吉非替尼(標準品)
游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒地美環(huán)鹽鹽 分析標準品乙酰氧肟 98%鹽吉西他濱
游離甲狀腺(FT4)ELISA試劑盒地美環(huán)鹽鹽 ≥90% (HPLC)雙(2-乙基)鹽鹽 98%鹽吉西他濱(標準品)
游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯乙酯 90%羧甲氧基半鹽鹽 98%甲磺吉米沙星
游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯乙酯 99%楊羥肟 99%甲磺吉米沙星(標準品)
游離雌三(FE3)ELISA試劑盒6,7-二羥基 分析標準品,≥98%二甲基二硅 CP,掃尾劑膽鈉
游離β絨毛膜促性腺(f-βhCG)ELISA試劑盒四丁基氫氧化銨,30 98%二甲基二硅 >98.5%(GC)醋胰高血糖
幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒p, p’-DDE 分析標準品亞麻乙酯 80%,天然醋戈那瑞林
幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒2,4-滴異辛酯 分析標準品亞麻乙酯 98%鹽格拉司瓊
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。