參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:乳酸桿菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013545
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
Beta-lactoglobulin/FITC 熒光標(biāo)記β-乳球蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Socs 2/FITC 熒光標(biāo)記細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKR1B10 糖還原相關(guān)蛋白質(zhì)抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.3ml
Gamma catenin γ連環(huán)蛋白/Catenin γ /γ鏈接抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG 兔抗豚鼠IgG 1mg
Socs 2/FITC 熒光標(biāo)記細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
HIS(Human Histamine) ELISA KIT 人組胺Multi-class antibodies: 48T
MMP-11 基質(zhì)金屬蛋白-11抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Integrin beta 3/CD61 整合β3抗體 0.1ml
EHF(Human epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody) ELISA Kit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgM 96T
Proteasome 20S alpha 2 蛋白體PSMα2抗體 0.2ml
C7orf59 7號(hào)染色體開放閱讀框59抗體 0.2ml
MMP-11 基質(zhì)金屬蛋白-11抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey human IgG/APC APC標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
GCAT 基合成抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARSK 芳香基酯K抗體 0.2ml
IDE/FITC 熒光標(biāo)記胰島降解抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
PKC delta/FITC 熒光標(biāo)記蛋白激C亞性D型抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
乳酸桿菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌種屬: Zymomonas│mobilis分離基物: 腐爛果提供形式: 凍結(jié)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)酒精培養(yǎng)基: 177生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
海洋海棲菌種屬: Oceanicola│marinus分離基物: 樣/海提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株;培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
產(chǎn)氣腸桿菌種屬: Enterobacter│aerogenes提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)研究,質(zhì)量控制培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 36℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
鏈球菌種屬: Streptococcus│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0109生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
白介1受體相關(guān)激1(IRAK1)ELISA試劑盒鹽吡哆 99%4,4'-二(9-咔唑)聯(lián) 98%氫鈣二(>98%,BR)
白介1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒1,4-哌二乙磺二鈉鹽 BC2,5-二(甲基)- 1-甲氧基-4- (2-乙基已氧基)- 98%碳鈰
白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒1,4-哌二乙磺倍半鈉鹽 99%2-溴-9-芴酮 96%胰凝乳蛋白原 A
白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒并五 98%9,9-二辛基-2,7-二溴基芴 97%汽巴藍(lán)
白介1β轉(zhuǎn)換(ICE)ELISA試劑盒 對(duì)二鈉 六合物 培養(yǎng)級(jí), ≥98%9,9-二己基-2,7-二溴芴 97%DEAE葡聚糖
白介1β前體(Pro-IL-1β)ELISA試劑盒對(duì)二鈉 for enzyme immunoassay,≥99.0%3-癸基噻吩 98%氟啶酮(>98%,植物級(jí))
白介1β前體(pro-IL1B)ELISA試劑盒鈉 AR,98.0% 9,9-二甲基-2,7-二溴芴 98%組(>98%,BC)
白介1β(IL-1β)ELISA試劑盒磺二甲氧嘧啶 98%2,7-二溴芴 98%海
白介1α(IL-1α)ELISA試劑盒D-(+)-海藻糖 二合物 from Saccharomyces cerevisiae, ≥99%2,6-二甲基-γ-吡喃酮 99%麥芽化, 硫銨懸浮液
白介1Rα(IL-1Rα)ELISA試劑盒三(羥甲基)甲基甘氨 99%2,7-二溴芴酮 96%草酮(>95%,植物級(jí))
白介19(IL-19)ELISA試劑盒三(羥甲基)甲基甘氨 99.5%2,6-二甲基-4H-4-亞吡喃基二 98%4-甲基傘形酮酰-alpha-D-吡喃糖苷
白介18結(jié)合蛋白(IL-18BP)ELISA試劑盒3,3′,5,5′-四甲基聯(lián) 98%3-己基噻吩 98%粘(>98%,BC)
白介18(IL-18)ELISA試劑盒3,3′,5,5′-四甲基聯(lián) ≥99%(HPLC)2-甲氧基-5-(2′-乙基已氧基)對(duì)二甲 98%N,N-二乙基對(duì)二硫鹽
白介17F(IL-17F)ELISA試劑盒3,3′,5,5′-四甲基聯(lián) standard for GC, ≥99.0% (GC)N,N′-二基-N,N′-(1-萘基)-1,1′-聯(lián)-4,4′-二(NPD) 99.萘酚AS-MX酯(>98%,BC)
白介17B(IL17B)ELISA試劑盒Tris乙磺 99%3-辛基噻吩 98%肼(>98%,BC)
白介17A(IL-17A)ELISA試劑盒三(羥甲基)氨鹽鹽 99%6,13-五并醌 99%硫氫(> 99%,BC)