實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加) |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
ESF(Human erythropoiesis stimulating factor) ELISA Kit 人紅細(xì)胞刺激因子Multi-class antibodies: 48T
SLK/Fyn 酪蛋白激Fyn(同步原癌基因)抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse human IgM ascites 小鼠抗人IgM腹 1ml
LAM(Human Lipoarabinomannan) ELISA Kit 人脂阿拉伯甘露聚糖 96T
SH3GL3 胞漿蛋白SH3GL3抗體 0.2ml
C-Myc 致癌基因C-Myc抗體 0.1ml
SLK/Fyn 酪蛋白激Fyn(同步原癌基因)抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
DUB(Human deubiquitinating enzyme) ELISA Kit 人泛分解Multi-class antibodies: 48T
GLUR4 谷受體4抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IGFBP5/IBP5 胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5抗體 0.1ml
VA ELISA Kit 大鼠A 96T
PRKAR1 蛋白激A調(diào)節(jié)亞基a1抗體 0.1ml
CDKN1C 周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體 0.1ml
GLUR4 谷受體4抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Mouse human IgG(3D3)/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml
GSTA1 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移α1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AT2R/AT1 血管緊張Ⅱ受體1抗體 0.2ml
HPV/FITC 熒光標(biāo)記人類狀瘤病毒抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
phospho-c-Jun (Ser63) /FITC 熒光標(biāo)記磷化原癌基因c-Jun抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬細(xì)小病毒染料法熒光定量PCR試劑盒50次土星漢遜酵母種屬: Hansenula│saturnus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法
球形賴氨芽孢桿菌種屬: Lysinibacillus│sphaericus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 殺蟲(chóng)范圍: 庫(kù)蚊培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
地衣芽孢桿菌種屬: Bacillus licheniformis (Weigmann) Chester emend. Gibson安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 桿菌肽A產(chǎn)生菌培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長(zhǎng)條件: 30℃,好氧
泛枝芽孢桿菌種屬: Virgibacillus│pantothenticus分離基物: 土壤/花園土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
轉(zhuǎn)膠蛋白(TAGLN)ELISA試劑盒2,2,2-三氟乙 分子生物學(xué)級(jí),99.8%3-(4-)戊二 98%偶氮胂 I
轉(zhuǎn)換蛋白2(TNP2)ELISA試劑盒2,2,2-三氟乙 NMR grade, ≥99.8%(4-溴基)乙炔 97%性品紅(生物染色級(jí))
轉(zhuǎn)換蛋白1(TNP1)ELISA試劑盒(3,3,3-三氟基)二甲基硅 98%4-溴-2-氟甲 98%性品紅(分析標(biāo)準(zhǔn)品)
轉(zhuǎn)化因子2β(TRA2β)ELISA試劑盒二 99%4-溴乙基 99%溴甲酚綠
轉(zhuǎn)化因子2α(TRA2α)ELISA試劑盒碳化鎢 粉末,99.9% metals basis, <10μm1-溴-3- 98%溴百里香酚藍(lán)
轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族V成員1(TRPV1)ELISA試劑盒三氟化甲絡(luò)合物 50-52 wt% BF3 1-溴-4- 98%溴甲酚紫
轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族M成員1(TRPM1)ELISA試劑盒特勒托利多 XS205DU 雙量程0-81g,分辨率0.01mg4-溴-2-氟 99%溴甲酚紫(98%)
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)ELISA試劑盒AL204電子天平 大稱量值/可讀性 210g/0.1mg1-溴-2-氟-4- 97%鉍試劑Ⅱ(CP)
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體Ⅱ(TGFβR2)ELISA試劑盒3-溴 98%4-溴-3-氟甲 97%鉍試劑Ⅱ(98%)
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體Ⅰ(TGFβR1)ELISA試劑盒六三聚 98%4-溴-3,5-二氟甲 98%鈹試劑Ⅱ
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒原甲酯 98%1-溴-4-n-丁基 97%溴鄰三酚紅
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGFβ3)ELISA試劑盒原甲酯 99.8%,無(wú)級(jí)1-溴-4-己 97%溴甲酚綠鈉
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)ELISA試劑盒原甲三乙酯 99%4-正丁基聯(lián) 97%鹽副品紅
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGFα)ELISA試劑盒原乙酯 98%4-溴-2-氟 98%二磺鋇(CP)
轉(zhuǎn)鈷蛋白Ⅰ(TCN1)ELISA試劑盒順式六氫酐 99%鄰溴 98%,含穩(wěn)定劑銅屑二磺鋇(98%)
轉(zhuǎn)谷氨酰7(TGM7)ELISA試劑盒氫化雙酚A 95%對(duì) 99%燦爛黃