詳細(xì)介紹
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013510 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對照,6個(gè)用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
|
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
NQO1/FITC 熒光標(biāo)記醌氧化還原抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SPECA/a-fodrin/FITC 熒光標(biāo)記a-包襯蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
CD105/轉(zhuǎn)化生長因子β受體抗體 CD105/Endoglin/TGF-β receptor 0.1ml
Goat rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml
Phospho-FGFR1+FGFR2 (Tyr463) 磷化性成纖維細(xì)胞生長因子受體1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh PMS1 錯(cuò)配修復(fù)基因PMS1抗體 0.1ml
SPECA/a-fodrin/FITC 熒光標(biāo)記a-包襯蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Human Leishimaria antibody ELISA Kit 人利什曼原蟲抗體Multi-class antibodies: 48T
KLF13/RFLAT-1 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子13Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LAPTM4A 溶體相關(guān)膜蛋白4α抗體 0.2ml
P-CK(Pig pan-cytokeratin) ELISA Kit 豬廣譜細(xì)胞角蛋白 96T
PRR7 突觸富含脯膜蛋白7抗體 0.2ml
CCDC129 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白129抗體 0.2ml
KLF13/RFLAT-1 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子13Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit Mink IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
G6PC3 葡萄糖-6-磷3/G6Pase-β抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARHGAP24 Rho GTP激活蛋白24抗體 0.2ml
IKB Alpha/FITC 熒光標(biāo)記KB抑制蛋白α抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MK IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
PLK1/STPK13/FITC 熒光標(biāo)記絲/蘇蛋白激Plk1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
禽呼腸孤病毒RT-PCR試劑盒50次蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Xylophilusampelinus種屬: Xylophilusampelinus安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0149生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
華根霉種屬: Rhizopus│chinensis分離基物: 酒曲提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 糖化培養(yǎng)基: 17生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
肝臟型脂肪結(jié)合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒乙鈉 98%穗花牡荊甙 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98% 酵母浸粉;酵母粉
肝臟甘油三脂脂肪(HTGL)ELISA試劑盒硫代甜菜 12 98%桃葉珊瑚苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%核糖核 A 溶液
肝型脂肪結(jié)合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒十二基硫鈉 97%,電泳白果內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%N,N'-烯酰
肝生長因子激活物(HGFA)ELISA試劑盒十二基硫鈉 99.0%,超純級巴卡丁 III 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%D-葡萄糖一
肝生長因子(HGF)ELISA試劑盒硫代甜菜 8 98%松果菊苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95% 十二基硫鈉(分子生物學(xué)級)
肝核因子1β(HNF-1B)ELISA試劑盒硫代甜菜10 98%雪上一枝蒿甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%聚乙二6000
肝結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒二甲藍(lán)FF 80%雪上一枝蒿乙 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%吐溫20
肝結(jié)合EGF樣生長因子(HBEGF)ELISA試劑盒10.0μL微量進(jìn)樣器 尖頭菊苣 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%5-溴-4--3-吲哚基-beta-D-葡糖苷環(huán)己鹽(X-GLUC)
肝輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒赤蘚紅B鈉鹽 85%分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%曲拉通X-100
肝癌抗原(PHC)ELISA試劑盒檸檬黃 >95%(HPLC)莪術(shù) 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%胰蛋白胨
肝X受體β(LXRβ)ELISA試劑盒六甲基二硅氧 99%α-藏花 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%生物;D-生物;維生 H 輔 R
肝X受體α(LXRα)ELISA試劑盒六甲基二硅氧 NMR grade, 99.7%天名精內(nèi)酯酮 23438甘油
甘油三酯(TG)ELISA試劑盒六甲基二硅 AR,98%西紅花苷Ⅱ 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95%檸檬鈉二;檸檬三鈉二
甘油-3-脫氫(GAPDH/G3PDH)ELISA試劑盒六甲基二硅 for GC, ≥99.0% (GC)重樓皂苷I 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%
甘油二酯(DAG)ELISA試劑盒六甲基二硅 CP,97%紫堇靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%明膠
甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒1-萘酚 AR,99.0%1-脫氧野尻霉 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95%Bacto酵母浸粉(BD原裝)