培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
改良型天狼猩紅染色試劑盒 | Enhanced Sirius Red Straining Kit | 100mL | 1~3天 |
商品介紹:
天狼猩紅是一種很強(qiáng)的酸性染料,易與膠原纖維中的堿性基團(tuán)反應(yīng),使膠原纖維產(chǎn)生明顯的雙折光現(xiàn)象,在偏振光顯微鏡下顯示特異性地呈現(xiàn)紅色。本產(chǎn)品就是在此原理的基礎(chǔ)上改良后開(kāi)發(fā)的產(chǎn)品。 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
即開(kāi)即用,用戶不需要單獨(dú)配制各種溶液。
染色過(guò)程只需幾分鐘,比傳統(tǒng)的-天狼猩紅染色方法更加快捷。
增強(qiáng)型,染色結(jié)果更加清晰,能根據(jù)顏色不同區(qū)分Ⅰ型和Ⅲ型膠原。而MASSON染色法卻不能顯示膠原類型。
可用于在普通顯微鏡下可以觀察膠原纖維的分布,也可用于在偏振光顯微鏡下區(qū)分I型和III型膠原。
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸和保存,有效期兩年。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鞣小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azure I橋粒芯糖蛋白2抗體包裝250g
乳果糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azure II發(fā)育相關(guān)蛋白DAZL抗體包裝50g
乳鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azure A chloride DNA聚合γ抗體包裝250mg
乳依沙吖啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triclosan死亡受體5抗體包裝250mg
乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Resazurin橋粒芯糖蛋白4抗體包裝1g
瑞格列奈(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Celestine blue自然殺傷激活受體相關(guān)蛋白DAP12抗體包裝250mg
瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azure B eosinate自然殺傷激活受體相關(guān)蛋白DAP12抗體包裝250mg
塞克硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Limaprost無(wú)精癥缺失基因4抗體包裝1g
塞來(lái)昔布,塞內(nèi)昔布(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azure II eosinate多能發(fā)育相關(guān)基因4抗體包裝5g
噻奈普汀;噻奈普汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Filipin complex from Streptomyces filipinensis鋅指蛋白DZIP1抗體包裝1g
三(羥基)基甘(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: RosuvastatinNotch信號(hào)通路Delta樣配體1抗體包裝250mg
三雙脒(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sudan I/Solvent Yellow 14同源轉(zhuǎn)錄因子DLX1抗體包裝100mg
三基間三酚(1,3,5-三氧基)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sudan II /Solvent Orange 7Hsp90輔助伴侶分子CDC37抗體包裝1g
三化釓六合物英文名稱: Sudan3肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白抗體包裝5g
三生(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sudan IV/Solvent Red 24金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1抗體包裝1g
凝結(jié)芽孢桿菌Bacillus│coagulans 質(zhì)量規(guī)格:>1200u/mg,CP2005胃泌釋放肽前體試劑盒α-松油;α-terpineol
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR胃泌釋放多肽試劑盒三七;BETA-N-OXALYLAMI
焦曲霉Aspergillus│ustus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胃泌試劑盒酚-3-O-β-D-槐糖苷;Kaem
改良型天狼猩紅染色試劑盒溴甲酚紫
其他溴甲酚紅;二溴鄰甲酚磺呋酞;二溴鄰甲酚磺酞;二溴鄰甲酚磺酰酞
英文名稱:BCP
其他英文名稱:Bromocresol purole;5',5''-Dibromo-o-cresolsulfonephthalein
產(chǎn)品規(guī)格:試劑級(jí),90%
包裝:10克/25克/100克
產(chǎn)品規(guī)格:IND
包裝:10克
CAS號(hào):115-40-2
C21H16Br2O5S=540.22
級(jí)別:Reagent Grade
用途:生化研究。指示劑
保存:RT