細(xì)胞凋亡與壞死檢測試劑盒

細(xì)胞凋亡與壞死檢測試劑盒公司*的商品：生物素標(biāo)記的兔抗小鼠IgG氨環(huán)（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat
Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG氨來呫諾；氨來諾(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG氨力農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG氨力農(nóng)（標(biāo)準(zhǔn)品）Human
PE標(biāo)記的兔抗小鼠IgG氨魯米特（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

商品介紹：

試劑盒組份：

細(xì)胞染色緩沖液———100ml

Hoechst染色液———0.5ml

PI染色液——————0.5ml

本試劑盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)雙染的方法。細(xì)胞發(fā)生凋亡時，染色質(zhì)會固縮。

Hoechst 33342可以穿透細(xì)胞膜，染色后凋亡細(xì)胞熒光會比正常細(xì)胞明顯增強(qiáng)。碘化丙啶(PI)不能穿透細(xì)胞膜，對于具有完整細(xì)胞膜的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞不能染色。而對于壞死細(xì)胞，其細(xì)胞膜的完整性喪失，碘化丙啶(PI)可以染色壞死細(xì)胞。上述兩種染料雙染后，使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測時，正常細(xì)胞為弱紅色熒光＋弱藍(lán)色熒光，凋亡細(xì)胞為弱紅色熒光＋強(qiáng)藍(lán)色熒光，壞死細(xì)胞為強(qiáng)紅色熒光＋強(qiáng)藍(lán)色熒光。參考下圖，左圖為誘導(dǎo)凋亡前的正常細(xì)胞，右圖為誘導(dǎo)凋亡后的細(xì)胞。

儲存條件：-20℃避光，有效期一年。
產(chǎn)品屬于：

培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

血纖蛋白原(Fbg)elisa試劑盒英文名稱：Fbg ELISA Kit脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體包裝100g

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血栓前體蛋白(TpP)elisa試劑盒英文名稱：TpP ELISA Kit腎上腺髓質(zhì)素抗體包裝1g

血清總補(bǔ)體(CH50)elisa試劑盒英文名稱：CH50 ELISA Kit腺苷受體A3抗體包裝5g

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血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)elisa試劑盒英文名稱：SAA3 ELISA Kit腎上腺素能受體β1抗體包裝5g

血清淀粉樣蛋白A(SAA)elisa試劑盒英文名稱：SAA ELISA Kit腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體包裝1g

血漿激肽釋放酶(KLKB1)elisa試劑盒英文名稱：KLKB1 ELISA Kit晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體包裝25g

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血紅素氧合酶1(HO-1)elisa試劑盒英文名稱：HO-1 ELISA Kitp53凋亡激蛋白1抗體包裝500g

血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)elisa試劑盒英文名稱：vWF ELISA KitP53凋亡激蛋白2抗體包裝250mg

血管舒緩激肽(BK)elisa試劑盒英文名稱：BK ELISA Kit激活素受體2B抗體包裝1g

肌動蛋白結(jié)合蛋白1抗體白介素2(IL2)Orteronel(TAK-700) was selected as a candidate for clinical evaluation. orterone
細(xì)胞凋亡與壞死檢測試劑盒紫脲酸銨

其他氨基紫色酸；紅紫酸銨；骨螺紫；紫尿酸胺；5，5′-次氮基二巴比土酸銨鹽；5-((六氫-2,4,6-三氧代-5-嘧啶基)亞氨基)-2,4,6(1H,3H,5H)嘧啶三酮單銨鹽

英文名稱：Murexide

其他英文名稱：Acid ammonium purpurate；Ammonium purpurate；5,5′-Nitrilodibarbituric acid ammonium salt

產(chǎn)品規(guī)格：IND

包裝：25克

CAS號：3051-09-0

C8H8N6O6=284.19

級別：IND

絡(luò)合試驗：合格

灼燒殘渣：≤0.1%

性狀：紅紫色結(jié)晶性粉末，帶有綠色金屬光澤。能與許多陽離子形成各種顏色的絡(luò)合物。溶于熱水，微溶于冷水，幾乎不溶于乙醇。其水溶液呈深紫色，并隨pH值不同而不同，在堿性溶液中呈深藍(lán)色，在酸性溶液中為無色。水溶液極易變質(zhì)。熔點＞300℃。大吸收波長(水中)520nm。

用途：生化研究。絡(luò)合指示劑(用以滴定鈣、銅、鈷、鎳、錳、鈧、鋅等)。鈣的光度測定

用途：生化研究。酸堿指示劑

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