大鼠Ⅳ型膠原ELISA檢測試劑盒

檢測原理：
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

ELISA試劑盒優(yōu)點：
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高，可靠性強
4、購買本公司的ELISA試劑盒，免費代測
5、技術(shù)服務(wù)要求：專業(yè)，規(guī)范，高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全：炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，科研隊伍，良好的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴。
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操作要點:
1）標(biāo)本的采取和保存：可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本；
2）試劑的準(zhǔn)備：所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液；
3）加樣：一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。
4）保溫：ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育。
5）洗滌：洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6）顯色和比色：顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng)，此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體，然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7）結(jié)果判斷：分定性判定和定量判定。
黑芝  種屬：Ganoderma sp.  描述 在木屑培養(yǎng)基上，不轉(zhuǎn)色，72天出原基；菇中型，菌蓋圓形，縱剖面近平形，菌蓋黃褐色，質(zhì)地中等硬度

皺蓋假芝（血芝）  種屬：Amauroderma rudis  描述 實體木栓化，菌蓋近圓形，菌柄中生，菌 孔污白色至暗褐色，. 受傷時產(chǎn)生出血紅色，后變黑色。菌體表面灰褐色至黑色，無假漆狀. 光澤，有顯著的縱紋和同心環(huán)帶，具微絨毛或無絨毛。邊緣鈍或呈截形，有時薄，波浪狀，稍內(nèi)卷。近圓形或腎形或不規(guī)則形

血紅栓菌  種屬：Trametes sanguinea  描述 子實體覆瓦狀疊生。革質(zhì)，無柄平伏而反卷，半圓形至貝殼狀，往往相互連接，1－6cm×10cm，厚0.1－0.3（0.45）cm，有細(xì)長毛和絨毛，灰褐色、灰黑色、黑色等多種顏色，有光滑、狹窄多彩的同心環(huán)帶，邊緣薄、完整或波浪狀。菌肉白色，厚0.5－1（1－1.5）mm。菌管長0.5－2（3）mm；管口白色、淺黃色或灰色，每毫米3－5個，孢子無色，光滑，長橢圓形，4.5－7.2μm×1.8－2.7μm

黃綠蜜環(huán)菌  種屬：Armillaria luteo-virens  提供形式 斜面培養(yǎng)物

香栓菌  種屬：Trametes suaveolens  描述 子實體覆瓦狀疊生。革質(zhì)，無柄平伏而反卷，半圓形至貝殼狀，往往相互連接，1－6cm×10cm，厚0.1－0.3（0.45）cm，有細(xì)長毛和絨毛，灰褐色、灰黑色、黑色等多種顏色，有光滑、狹窄多彩的同心環(huán)帶，邊緣薄、完整或波浪狀。菌肉白色，厚0.5－1（1－1.5）mm。菌管長0.5－2（3）mm；管口白色、淺黃色或灰色，每毫米3－5個，孢子無色，光滑，長橢圓形，4.5－7.2μm×1.8－2.7μm

榆生離褶傘  種屬：Lyophyllum ulmarium  描述 菌蓋直徑7~15cm，扁半球形，中部淺赭石色，邊緣淺黃色，逐漸平展，光滑，有時龜裂。菌肉白色，厚。菌褶白色或近白色，彎生，寬，稍密。菌柄長4~9cm，粗1~2cm，偏生，往往彎曲，白色，內(nèi)實。孢子無色，球形至近球形，5~6μm。

花臉香蘑  種屬：Lepista sordida  描述 菌蓋直徑3~7.5cm，半球形至平展，有時中部中凹，薄，濕潤時半透明狀或水浸狀，紫色。邊緣內(nèi)卷，具不明顯的條紋。菌肉帶淡紫色，??； 菌褶淡藍(lán)紫色，直生到彎生，有時稍延生，稍稀，不等長； 菌柄長3~6.5cm，粗0.2~1cm，同菌蓋色，靠近基部常彎曲，內(nèi)實； 無菌環(huán)及菌托； 孢子印帶粉紅色，孢子無色，具麻點至粗糙，橢圓形至近卵圓形，(6.2~9.8)μm×(3.2~5)μm。

大球蓋菌  種屬：Stropharia rugoso-annulata  描述 子實體單生、叢生或群生。菌蓋直徑7－45cm，初近半球形，后平展，紅褐色或暗褐色，老后褐色至灰褐色，表面平滑，有纖維狀或細(xì)纖維狀鱗片，濕時稍有粘性，菌肉肥厚，白色。菌褶（與菌柄）直生，初近白色，后成暗紫灰色，稍寬，褶緣有不規(guī)則的缺刻。菌柄粗壯，9－15×1－4cm，向基部漸粗，中實或空，表面平滑，有絲狀光澤，初白色，后灰褐黃色，菌環(huán)厚，膜質(zhì)，環(huán)上有深溝紋，深裂成星形，裂片先端向上卷，菌環(huán)易脫落，在老熟的子實體上常消失，孢子印紫褐色，孢子12－15×6.5－9μm，橢圓形，頂端有明顯的芽孔，厚壁，褐緣囊狀體棍棒狀，頂端有小突起，3.5－5.0×8.5－14.5μm

牛肝菌  種屬：Boletus edulis  提供形式 斜面培養(yǎng)物

大孔菌  種屬：Polyporus alveolaris  提供形式 斜面培養(yǎng)物

松木層孔菌  種屬：Phellinus pini  描述 子實體多年生，無柄，木質(zhì)，通常單生，有時復(fù)瓦狀疊生，新鮮時硬木栓質(zhì)，干燥后變?yōu)槟举|(zhì)，且質(zhì)量明顯變輕。單個子實體大小為4－9 cm × 3－8 cm × 2－3 cm。菌蓋半圓形或近圓形，上表面生長初期有微細(xì)絨毛，后期變?yōu)榇植诓⒂胁灰?guī)則龜裂，黑褐色或灰褐色，有同心環(huán)溝，邊緣鈍，黃褐色；或暗褐色。管口面黃褐色至銹褐色，有折光效應(yīng)，不育的邊緣明顯，達(dá)5mm 寬，黃褐色；管口近圓形，每毫米8－10，管口邊薄且全緣，菌肉黃褐色，木栓質(zhì)，遇KOH變黑，達(dá)1cm厚。菌蓋上表面后期形成一薄殼。菌管多層，分層明顯，當(dāng)年生菌管金黃褐色，老菌管淺褐色，木栓質(zhì)，達(dá)2 cm 長。 菌肉：菌絲占多數(shù)，無色至淺黃色和金黃色，薄壁至厚壁，通常簡單分隔，直徑為3.5－4.5μm；骨架菌絲占少數(shù)，金黃色，厚壁且有1 空腔，不分隔且不分枝，規(guī)則排列，直徑為4－5μm。菌管：菌絲占少數(shù)，一般存在于亞子實層，無色，薄壁，通常簡單分隔，偶爾分枝，直徑為1.8－2.8μm；骨架菌絲占多數(shù)，金黃色，厚壁且有1中等程度空腔，偶爾分隔，不分枝，大致平行于菌管排列，直徑為2.1－3.2μm。 擔(dān)子窄圓桶形，著生4 個擔(dān)孢子梗，基部有一簡單分隔，擔(dān)子大小為7.5－10.0μm × 4.2－5.8μm；類擔(dān)子占多數(shù)，圓桶形或近球形，比擔(dān)子稍小。擔(dān)孢子橢圓形，厚壁，褐色，光滑，

銳鱗環(huán)柄菇  種屬：Lepiota acutesquamosa  描述 在木屑培養(yǎng)基上，不轉(zhuǎn)色，80天出原基；菇中型，菌蓋圓形，縱剖面近平形，菌蓋黃褐色，質(zhì)地中等硬度

樺剝管菌(樺滴孔菌)  種屬：Piptoporus betulinus  描述 菌蓋近肉質(zhì)至木栓質(zhì)，扁半球形、扁平，靠基部著生部分常凸起，4-24×5-35cm,，厚2-10cm，表面光滑，初期污白褐，后呈褐色，有一層薄的表皮，可剝離露出白色菌肉，邊緣內(nèi)卷。菌肉很厚，近肉質(zhì)而柔韌，干后比較輕，呈木質(zhì)。 無柄或幾無柄。 孢子無色，光滑，彎曲，圓筒形或臘腸形，(4~7)μm×(1.5~2)μm。

假蜜環(huán)菌  種屬：Armillariella tabescens  描述 在木屑培養(yǎng)基上，不轉(zhuǎn)色，80天出原基；菇中型，菌蓋圓形，縱剖面近平形，菌蓋黃褐色，質(zhì)地中等硬度

英文名稱:Rhodopseudomonas pentothenatexigens，五齒紅假單胞菌

菌種又名:

中文名稱:五齒紅假單胞菌

菌種代號:KCTC 15143; NBRC 108862; JA575

分離:土壤

來源歷史:<< KCTC

培養(yǎng)基:

584

PYM Medium

Polypepton* 10 g

Distilled water 1 L

Agar (if needed) 15 g

Yeast extract 2 g

MgSO4·7H2O 1 g

pH 7.0 (*Prepared medium is available from Wako Pure Chemical Ind., Ltd., Osaka, Japan.)

924

Rhodopseudomonas medium

NaCl 0.4 g

NH4Cl 0.6 g

CaCl2·2H2O 0.05 g

Sodium pyruvate 3.0 g

Yeast extract 0.3 g

Ferric Citrate (0.1 % w/v) 5.0 mL

Micronutrient solution SL-7 1.0 mL

Vitamin B12 1.0 mL

KH2PO4 0.5 g

MgSO4·7H2O 0.2 g

final pH 7.0, add distilled water to 1.0 L.

Ferric Citrate (0.1 % w/v)

Ferric Citrate 0.1 g

ddH2O 100 mL

Ferric citrate was taken and add distilled water and dissolved by heating.

Micronutrient solution SL-7

ZnCl2 70 mg

MnCl2·4H2O 100 mg

CoCl2·6H2O 200 mg

H3BO3 60 mg

Na2MoO4·2H2O 40 mg

CuCl2·2H2O 20 mg

NiCl2·6H2O 20 mg

pH was adjusted to 6.8-7.0 with 1N NaOH/1N HCl before autoclaving.

培養(yǎng)條件:25°C 5天,厭氧

菌種說明:1.菌株復(fù)活：凍乾管破管後以0.2-0.5 ml無菌水回溶乾燥菌塊?；厝芫罕仨毴课≈?10 ml 的新鮮培養(yǎng)基中進行活化培養(yǎng)。 2.特殊培養(yǎng)條件：厭氧和光照。 3.增殖培養(yǎng)的接種量需求：接種菌液的體積必須佔新鮮培養(yǎng)基的 20% 至 50%。

生物安全等級:1
大鼠Ⅳ型膠原ELISA檢測試劑盒Sphingomonas│azotifigens 中文名稱：固氮鞘氨醇單胞菌Sphingomonas│azotifigens分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類、研究，可以用來生物肥料。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:65生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；礦物油法 純度：≥98%

Brevundimonas│kwangchunensis 中文名稱：光村短波單胞菌Brevundimonas│kwangchunensis分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類、研究，可以用來農(nóng)田土壤及環(huán)境修復(fù)微生物制劑。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；礦物油法 純度：≥98%

Sphingomonas│pseudosanguinis 中文名稱：偽血鞘氨醇單胞菌Sphingomonas│pseudosanguinis分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類、研究，可以用來生物肥料。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:65生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；礦物油法 純度：≥98%

Arthrobacr│oryzae 中文名稱：稻節(jié)桿菌Arthrobacr│oryzae分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類、研究，可以用來生物肥料。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:65生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；礦物油法 純度：≥98%

Bacillus│nealsonii 中文名稱：尼氏芽孢桿菌Bacillus│nealsonii分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類、研究，可以用來生物肥料。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:65生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；礦物油法 純度：reagent grade, 98%

Paenibacillus│daejeonensis 中文名稱：大田類芽孢桿菌Paenibacillus│daejeonensis分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類、研究，可以用來生物肥料。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:65生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；礦物油法 純度：reagent grade, 98%

Flavobacrium│mizutaii 中文名稱：氏黃桿菌(噬果膠黃桿菌)Flavobacrium│mizutaii分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類、研究，可以用來農(nóng)田土壤及環(huán)境修復(fù)微生物制劑。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；礦物油法 純度：>98.0%(GC)

Bacillus│vireti 中文名稱：原野芽孢桿菌Bacillus│vireti分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類、研究，可以用來生物肥料。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:65生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；礦物油法 純度：98%
ELISA試驗時，注意事項如下： 
     1. 正式試驗時，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。