詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:豬細(xì)小病毒PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013595
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
KLK4/FITC 熒光標(biāo)記激肽釋放4抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Slit2/Slil3/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALOX15B/15 Lipoxygenase 2 花生四烯15脂氧合2抗體 0.2ml
Rabbit human IgM/Bio 生物標(biāo)記的兔抗人IgM 0.3ml
GLYR1 氧化還原GlyR1/核蛋白60抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
Slit2/Slil3/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SOD(Human Super Oxidase Dimutase) ELISA Kit 人超氧化物歧化Multi-class antibodies: 48T
-5 神經(jīng)生長因子4/5抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IFN-Alpha/IFNA1/IFNA13/Interferon alpha 1 干擾α抗體 0.1ml
CA(Mouse catecholamine)ELISA Kit 小鼠兒茶酚胺 96T
Prion protein PrP/CD230 朊病毒蛋白CD230抗體 0.2ml
CERKL 視網(wǎng)膜色變性蛋白26抗體 0.2ml
NT-4/NT-5 神經(jīng)生長因子4/5抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Mouse human IgG(3D3)/APC APC標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml
GSTK1 甘肽S轉(zhuǎn)移κ抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AT2R2 血管緊張Ⅱ受體2抗體 0.2ml
Hpt/HP /FITC 熒光標(biāo)記結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG-Fc/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
phospho-c-Jun (Thr93) /FITC 熒光標(biāo)記磷化原癌基因c-Jun抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬細(xì)小病毒PCR試劑盒50次開菲爾乳桿菌種屬: Lactobacilluskefiri安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究,開非爾乳培養(yǎng)基: 58生長條件: 37℃
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
堪薩斯分枝桿菌種屬: Mycobacterium│kansassi提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
玫瑰鏈孢囊菌種屬: Streptosporangium│roseum提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: CM0039生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
轉(zhuǎn)谷氨酰6(TGM6)ELISA試劑盒甲基納迪克酐 95%4- 97%剛果紅(AR)
轉(zhuǎn)谷氨酰5(TGM5)ELISA試劑盒3,4,5,6-四氫酐 98%3-乙炔 97%甲酚紅
筑絲蛋白5(TEKT5)ELISA試劑盒2-乙酰吡咯 ≥98%, FG1,4-環(huán)己二酮 98%鄰甲酚酞
筑絲蛋白4(TEKT4)ELISA試劑盒乳丁酯 98%4-基-4'-基聯(lián) 99%鈣羧指示劑(AR)
筑絲蛋白3(TEKT3)ELISA試劑盒四氫噻吩-3-酮 98%4'-乙基-4-聯(lián)二 99%鈣羧指示劑(Indicator)
筑絲蛋白1(TEKT1)ELISA試劑盒四氫噻吩-3-酮 ≥98%, Kosher, FG對基辛氧基聯(lián) 98%酚紅
主要性蛋白(MBP)ELISA試劑盒乙基麥芽酚 99%4"-戊基-4-對三聯(lián) 99%鈣鎂試劑
蛛受體3(LPHN3)ELISA試劑盒2-乙酰呋喃 99%1--4-乙炔基 98%鄰甲酚酞絡(luò)合劑
蛛受體2(LPHN2)ELISA試劑盒1,6-己二硫 97%3,4-二氟 98%鎘試劑
蛛受體1(LPHN1)ELISA試劑盒巰基乙甲酯 96%2,3-二氟 98%銅鐵試劑
肘臀蛋白(CUBN)ELISA試劑盒甲硫 99%3,5-二氟甲 97%間甲酚紫
軸突生長誘向因子G2(NtnG2)ELISA試劑盒甲硫 Standard for GC,>99.7%(GC)1,4-環(huán)己二酮單乙二縮酮 98%二磺鈉(AR,IND)
軸突生長誘向因子G1(NtnG1)ELISA試劑盒甲硫 ≥99%, FCC, FG1,4-二 98%二磺鈉(≥97.0% (HPLC))
軸突生長誘向因子5(Ntn5)ELISA試劑盒3-甲硫基 98%2,3-二氟甲 97%二偶氮碳酰肼(AR)
軸突生長誘向因子3(Ntn3)ELISA試劑盒3-甲硫基 ≥97%, FG3,4-二氟 97%二偶氮碳酰肼(>60%(HPLC))
軸突蛋白3(NRXN3)ELISA試劑盒2,3-戊二酮 98%對乙基 97%二甲基黃