詳細介紹
服務流程:
1、根據(jù)客戶提供的基因序列設計特異性引物和熒光探針(染料法只需設計引物)
2、抽提DNA、RNA,并對RNA進行逆轉錄
3、實時熒光定量PCR
4、提供完整的實驗結果報告(檢測數(shù)據(jù)、溶解曲線、擴增曲線)
5、返還樣品(引物、RNA和cDNA)
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參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:轉基因品系小麥MON71800染料法qPCR試劑盒
產品規(guī)格:50次
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
靛藍二磺酸鈉ATP2A1/SERCA1 (L24) Antibody羥基-甲酸
變色酸鈉,鉻變酸二鈉HMGCS1 (D1Q9D) Rabbit mAb氟-三氟酚
溴百里酚藍鈉鹽Phospho-Tie2 (Tyr992) Antibody衣康酸二甲酯
特地唑游離CDC37 (D28H7) Rabbit mAbN,N-二酰
水合;三Bcl-2 (D55G8) Rabbit mAb (Human Specific)聚氧氫化蓖麻油
對二甲氨基甲 (DMAB)Bcl-2 (D55G8) Rabbit mAb (Human Specific)2-基呋喃
特地唑;特地唑酸酯Tie2 (AB33) Mouse mAb硅藻土
酚紅鈉鹽Phospho-Tie2 (Ser1119) Antibody氧基椰油烷基
甲基-2-并噻唑酮腙鹽酸鹽,水合β-Amyloid (D54D2) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)N,N'-二甲基-1,2-環(huán)己二
赤蘚紅;赤蘚紅B鈉鹽Phospho-PI3 Kinase p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) Antibody順式-羥基-L-脯氨酸
達拉菲尼,達帕菲尼Phospho-PI3 Kinase p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) Antibody3,5-二溴甲酸
安賽蜜;AK糖Phospho-PI3 Kinase p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) Antibody甲酸甲酯
酰檸檬酸三丁酯NaPi2b/SLC34A2 (D6W2G) Rabbit mAbSOLUTOL HS 15
酰檸檬酸三酯Dexras1 Antibody2-溴-4'-酮
海藻酸nNOS (C7D7) Rabbit mAb對溴甲酸甲酯
維生素C棕櫚酸酯/L-抗壞血酸棕櫚酸酯EI24 (D3F6Z) Rabbit mAb氨基甲酸甲酯
阿斯巴甜Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) Rabbit mAb (Sepharose® Bead Conjuga)對甲酸甲酯
克拉維酸Fas (C18C12) Rabbit mAb肼基甲酸
轉基因品系小麥MON71800染料法qPCR試劑盒青鏈霉素混合液 TMPRSS15(Enteropeptidase) 100 ug
精制胎牛血清 SPAST(Spastin) 100 ug
新生牛血清 TOM20(translocase of outer mitochondrial membrane 20 homolog) 100 ug
無激素胎牛血清(活性碳/葡聚糖處理) MLKL(mixed lineage kinase domain-like) 100 ug
血清活性碳/葡聚糖處理 HSD3B7(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 7) 500 ul
胰蛋白酶中和液 MVK(Mevalonate kinase) 100 ul
細胞培養(yǎng)細菌污染定性熒光 CRTC2(CREB-regulated transcription coactivator 2) 100 ul
細胞培養(yǎng)病污染溶斑法結晶紫染色 total SOD(superoxide dismutase) 20 ul
細胞培養(yǎng)病污染溶斑法中性紅染色 CD97(CD97 antigen) 100 ug
通用型細胞培養(yǎng)污染性支原體屬鑒定16S rDNAPCR擴增 TLR8(Toll-like receptor 8) 100 ug
細胞培養(yǎng)污染性支原體熒光染色鑒定 peptidoglycan(peptidoglycan) 100 ug
細胞培養(yǎng)污染性支原體M.fermentans鑒定16S rDNAPCR擴增 TNFα(Tumor Necrosis Factor Alpha) 100 ug
細胞培養(yǎng)污染性支原體M.hyorhinis鑒定16S rDNAPCR擴增 IL-6(Interleukin 6) 100 ug
細胞培養(yǎng)污染性支原體M.orale鑒定16S rDNAPCR擴增 MBD3(Methyl-CpG-binding domain protein 3) 100 ug
細胞培養(yǎng)污染性支原體M.hominis鑒定16S rDNAPCR擴增 MBD2 100 ug
細胞培養(yǎng)污染性支原體M.arginini鑒定16S rDNAPCR擴增 DNASE2(Deoxyribonuclease-2-alpha) 1 Kit