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轉(zhuǎn)基因品系水稻BT63探針法qPCR試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-14 10:26:36瀏覽次數(shù):241

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號(hào) FS-P013392 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
轉(zhuǎn)基因品系水稻BT63探針法qPCR試劑盒的銷售產(chǎn)品:Rac1 (Phospho-Ser71) Antibody
Raf1 (Phospho-Ser338) Antibody
MEK1/MEK2 (Phospho-Ser217/Ser221) Antibody

詳細(xì)介紹

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

轉(zhuǎn)基因品系水稻BT63探針法qPCR試劑盒

50次

FS-P013392

 

QQ截圖20201022162313.png 

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。

2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,

多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),

一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

sIL-6R ELISA Kit 大鼠可溶性白介6受體Multi-class antibodies: 48T

 SYT3 突觸結(jié)合蛋白3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat  Guinea pig IgG/APC APC標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG  0.1ml

ET ELISA Kit 大鼠內(nèi) 96T

NFIB 核因子1B抗體 0.2ml

Aggrecan 短蛋白聚糖抗體 0.2ml

 SYT3 突觸結(jié)合蛋白3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

GS-ANA(Human granulocyte specific antinuclear antibody) ELISA Kit 人粒細(xì)胞特異性抗核抗體Multi-class antibodies: 48T

 IGFBP2 胰島樣生長因子結(jié)合蛋白2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh MALT1 粘膜相關(guān)組織瘤轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體  0.2ml

Human histon-H2b ELISA Kit 人組蛋白H2b 96T

RAB40B RAS癌基因家族蛋白R(shí)AB40B抗體 0.2ml

Cathepsin K 組織蛋白K抗體 0.1ml

 IGFBP2 胰島樣生長因子結(jié)合蛋白2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  mouse IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

G gamma14 G蛋白偶聯(lián)受體γ14抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Ankyrin B/Ankyrin brain 錨定蛋白B抗體  0.2ml

 IMP3/FITC 熒光標(biāo)記胰島樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗人IgG  0.1ml

 RNF148/FITC 熒光標(biāo)記環(huán)指蛋白148抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
轉(zhuǎn)基因品系水稻BT63探針法qPCR試劑盒克魯斯假絲酵母種屬: Candida krusei提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 高溫生香酵母。培養(yǎng)基: 5 °Bé麥芽汁瓊脂:5°Bé麥芽汁 1.0L,瓊脂 15.0g,自然pH。121℃,15min。生長條件: 28-30℃,好氧存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

芽孢八疊球菌種屬: Sporosarcina│sp.分離基物: 沉積物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的新種培養(yǎng)基: 221生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

異型酒香酵母種屬: Brettanomycesanomalus安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于酒精發(fā)酵培養(yǎng)基: 13(麥芽汁)生長條件: 25-28℃

異鎖鏈(IDES)ELISA試劑盒固紅TR半化鋅鹽 90%聚乙二單甲 平均分子量1000來曲唑

異檸檬脫氫(ICD)ELISA試劑盒固紫B鹽 80%蒽酮 AR來曲唑(標(biāo)準(zhǔn)品)

異常原(APT)ELISA試劑盒N-甲酰-L-甲硫氨酰-L-白氨酰-L氨 97%N-乙酰-D-半乳糖,合 98%醋亮瑞林

異腎上腺(iso-Hyd)ELISA試劑盒(S)-(-)-2-甲酰琥珀酐 90%,工業(yè)級(jí)偶氮二甲二異酯 95%左乙拉西坦

乙酰乙(ACAC)ELISA試劑盒D-果糖-6-二鈉,二 98%偶氮二甲二叔丁酯 98%左乙拉西坦(標(biāo)準(zhǔn)品)

乙酰肝(HPA)ELISA試劑盒鈣熒光探針FIuo,3-AM 70%4,4-二溴聯(lián)  98%鹽林可霉

乙酰輔A羧化合成(ACC)ELISA試劑盒熒蒽 分析標(biāo)準(zhǔn)品3'-羥基乙酮 98%鹽林可霉(標(biāo)準(zhǔn)品)

乙酰酯(AChE)ELISA試劑盒D-半乳糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品硫新霉 USP級(jí),680 I.U./mg三代甲狀腺鈉鹽

乙酰受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒羥基乙酰 98%土霉  97%鹽洛美沙星

乙酰(ACH)ELISA試劑盒三油甘油酯 99%異酯 99%(劇品)鹽洛美沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)

乙脫氫18家族成員A1(ALDH18A1)ELISA試劑盒戊二酰 97%鄰硝 99%替潑諾

乙脫氫(ALDH)ELISA試劑盒甘草次(α型) 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%對(duì)硝 99%替潑諾(標(biāo)準(zhǔn)品)

乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)ELISA試劑盒N-(γ-L-谷氨酰)-1-萘 BR間硝 CP洛伐他汀

乙脫氫(ADH)ELISA試劑盒L-甘油鈣鹽,一 97%間硝 分析標(biāo)準(zhǔn)品洛伐他汀(標(biāo)準(zhǔn)品)

乙呋酮(AD)ELISA試劑盒DL-甘油 90%間硝 standard for GC, ≥99.5% (GC)盧比前列腺/盧比前列酮

胰脂肪(PL)ELISA試劑盒甘氨脫氧膽 97%間硝標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:甲賴氨加壓;賴氨加壓
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。


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