詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:豬源性成分PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-02R6377
產(chǎn)品規(guī)格:48T
產(chǎn)品分類:恒溫熒光法
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
Bcl-2 ELISA Kit 大鼠B細胞瘤因子2Multi-class antibodies: 48T
TRPM2 瞬時受體電位離子通道蛋白抗體(M亞家族)Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ghrelin/Obestatin 腦腸肽抗體 0.1ml
ADAM8 ELISA Kit 大鼠解整合樣金屬蛋白8 96T
NGB 腦紅蛋白/神紅蛋白/神經(jīng)球蛋白抗體 0.1ml
ANKS6 錨蛋白重復及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 0.2ml
TRPM2 瞬時受體電位離子通道蛋白抗體(M亞家族)Multi-class antibodies: 0.2ml
CYFRA21-1(Human cytokeratin fragment antigen 21-1) ELISA Kit 人細胞角蛋白21-1片段Multi-class antibodies: 48T
Phospho-HER3 (Tyr1222) 磷化HER3受體抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MIA2 黑色瘤抑制活性蛋白2抗體 0.2ml
uPA/PLAU(Human urokinase-type plasminogen activator) ELISA Kit 人尿激型纖溶原激活物 96T
RNF149 環(huán)指蛋白149抗體 0.2ml
CEP72 中心體蛋白72抗體 0.1ml
Phospho-HER3 (Tyr1222) 磷化HER3受體抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit Bovine IgM/Cy7 Cy7標記的兔抗IgM 0.1ml
phospho-GATA3 (Ser115) 磷化GATA結(jié)合蛋白3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ACTRIC/Activin A Receptor Type IC 激活受體1C抗體 0.2ml
Mcl-1/FITC 熒光標記髓樣細胞白血病-1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bov IgG/Gold 膠體金標記的兔抗IgG 0.5ml
RALDH2/FITC 熒光標記視黃脫氫2型抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬源性成分PCR檢測試劑盒細胞培養(yǎng)基D-葡萄糖法檢測試劑盒20次犬血栓B2elisa檢測試劑盒
果菜D-葡萄糖氧化法檢測試劑盒20次猴γ干擾elisa檢測試劑盒
乳品D-葡萄糖氧化法檢測試劑盒20次猴載脂蛋白A1elisa檢測試劑盒
食物D-葡萄糖氧化法檢測試劑盒20次兔子孕/孕酮elisa檢測試劑盒
糖果D-葡萄糖氧化法檢測試劑盒20次兔子可溶性粘附分子elisa檢測試劑盒
細胞培養(yǎng)基D-葡萄糖氧化法檢測試劑盒20次兔子白介10elisa檢測試劑盒
葡萄糖待測樣品處理試劑盒20次兔子皮質(zhì)醇elisa檢測試劑盒
糖類乳糖含量連續(xù)反應光譜法檢測試劑盒20次犬雌elisa檢測試劑盒
乳制品乳糖含量連續(xù)反應光譜法檢測試劑盒20次山羊白介4elisa檢測試劑盒
食物乳糖含量連續(xù)反應光譜法檢測試劑盒20次犬主要組織相容性復合體elisa檢測試劑盒
細胞培養(yǎng)基乳糖含量連續(xù)反應光譜法檢測試劑盒20次犬肌鈣蛋白Ⅰelisa檢測試劑盒
血液乳糖含量連續(xù)反應光譜法檢測試劑盒20次猴抗肝膜抗體elisa檢測試劑盒
體液乳糖含量連續(xù)反應光譜法檢測試劑盒20次內(nèi)皮1elisa檢測試劑盒
乳糖待測樣品處理試劑盒20次兔子S100B蛋白elisa檢測試劑盒
糖類D-半乳糖含量光譜法檢測試劑盒20次兔子白介4elisa檢測試劑盒