詳細(xì)介紹
檢測原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Rabbit matrix metalloproteinase 5 (MMP-5) ELISA Kit | FS-R5622 |
ELISA試劑盒優(yōu)點:
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,良好的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
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操作要點:
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
Thioredoxin硫氧化還原蛋白種屬: Zygosaccharomyces│microellipsoides小橢圓結(jié)合酵母
Lecithin-Cholesterol Acyltransferase卵磷脂膽固醇?;D(zhuǎn)移酶種屬: Hannaella│kunmingensis昆明漢納酵母
Immunoglobulin A免疫球蛋白A種屬: Altererythrobacter│marensis馬羅島交替赤細(xì)菌
Immunoglobulin E免疫球蛋白E種屬: Brevundimonas│aurantiaca黃色短波單胞菌
Immunoglobulin G免疫球蛋白G種屬: Rhodococcus│phenolicus酚紅球菌
Immunoglobulin M免疫球蛋白M種屬: Ganoderma│applanatum (Pers.) Pat.樹舌1-2
brain natriuretic peptide腦鈉素;腦鈉尿肽種屬: Auricularia│auricula (Hook. f.) Underw.黑木耳8808
Brain derived neurotrophic facor腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子種屬: Streptomyces│glaucus (ex Lehmann and Schutze 1912) Agre and Pre#青色鏈霉菌
endotoxin內(nèi)毒素種屬: Paxillus│involutus (Batsch) Fr.銀盤菌
Endothelin內(nèi)皮素種屬: Lentinus│revalatus細(xì)毛香菇
Endothelin 1內(nèi)皮素1種屬: Gloeosporium│mangiferea芒果盤長孢菌
Urine creatinine尿肌酐種屬: Alishewanella│aestuarii潮汐別樣希瓦氏菌
urokinase-type plasminogen activator尿激酶型纖溶酶原激活物種屬: Toxoplasma│gondii弓形蟲(GTS-3株)
Urea nitrogen尿素氮種屬: Rhizopus│suzhou蘇州根霉
thrombin-antithrombin complex凝血酶抗凝血酶復(fù)合物種屬: Psathyrella│candolleana (Fr.) Maire薄花邊傘2-3
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5ELISA檢測試劑盒小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Bacillus subtilis
大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Rhizopus arrhizus
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 1ml
大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Candida valida
大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Arthrobacter agilis
ELISA試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。