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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：巴爾通體通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013539
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
Laminin alpha5/FITC 熒光標記層粘蛋白α5抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Socs 3/FITC 熒光標記細胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKR1B1 糖還原抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/Gold 膠體金標記的兔抗馬IgG 0.5ml
GPR158 G蛋白偶聯(lián)受體GPR158蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗羊IgM 0.3ml
Socs 3/FITC 熒光標記細胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
sVE-Cadherin (Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體Multi-class antibodies： 48T
PAG608 p53活化基因608單克隆抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSD3B1 滋養(yǎng)層細胞抗原3β-HSD抗體 0.1ml
T3(Mouse Tri-iodothyronine)ELISA Kit 小鼠狀腺原 96T
Proteasome 20S alpha 3(Ser250) 磷化蛋白體PSMα3抗體 0.1ml
Chordin 原腸胚雙向形成相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
PAG608 p53活化基因608單克隆抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Donkey human IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的驢抗人IgG 0.1ml
GCAP2 鳥苷環(huán)化激活蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARSF 芳香基酯F抗體 0.2ml
IDE/FITC 熒光標記胰島降解抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗猴IgG 0.1ml
PKN2 /FITC 熒光標記蛋白激N2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
巴爾通體通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次刺糖多孢菌種屬: Saccharopolyspora│spinosa提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 609生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
土地鹽紅菌種屬: Halorubrum│terrestre提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0212生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
香菇種屬: Lentinula│edodes提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用培養(yǎng)基: 0017生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
維涅蘭德固氮菌種屬: Azotobacter│vinelandii提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: C*tion (3363). Fixes nitrogen. Preservation (3363).培養(yǎng)基: 0063生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法
白介6(IL-6)ELISA試劑盒N-2-哌-N'-2-乙磺鈉鹽 99.5%L-亮氨乙酯鹽鹽 99%氫鋁(>98%,BR)
白介5受體alpha(IL5RA)ELISA試劑盒磺鈉 98%L-亮氨甲酯鹽鹽 98%銨三(>98%,BR)
白介-5(IL-5)ELISA試劑盒對羥基甲鈉 CP,98%4'-甲氧基酮 99%碳鋇(>99%,BR)
白介5(IL-5)ELISA試劑盒對羥基甲鈉 99%對酮 96%甲酰(>98%,BR)
白介4受體(IL4R/CD124)ELISA試劑盒N-2-哌-N'-2-乙磺 99%香豆靈甲酯 98%比布里希猩紅(>90%,BS)
白介4(IL-4)ELISA試劑盒魯米諾 98%4-甲基-2-氧戊 98%檸檬鈣；檸檬鈣四
白介37(IL-37)ELISA試劑盒3-(N-啉)磺鈉 99.5%(T)6-硝基吲唑 98%硫銫(分子生物學(xué)級)
白介35(IL-35)ELISA試劑盒N，N′-烯酰 CP,97%4-吡啶-4-基甲 98%銅片
白介33(IL-33)ELISA試劑盒N，N′-烯酰 for electrophoresis, ≥99.0% (T)4-甲氧基酮 98%化亞銅(>97%,BR)
白介32(IL-32)ELISA試劑盒N，N′-烯酰 for molecular biology, ≥99.0% (T)酮 98%化亞銅(>99%,BR)
白介31(IL-31)ELISA試劑盒 嗎啉乙磺,一 分子生物學(xué)級, ≥99% (T)酮 99%2'-脫氧鳥苷5'二二鈉鹽
白介3(IL-3)ELISA試劑盒3-(N-啉)磺 99%L-氨乙酯鹽鹽 98%D-葡萄糖鈉(> 98%，BR)
白介2誘導(dǎo)的T激(ITK)ELISA試劑盒嗎啉乙磺鈉鹽 99%2-羥基喹喔啉 99%乙二四乙二鈉一鈣鹽
白介2受體(IL-2R)ELISA試劑盒6-甲氧基喹啉 96%?；敲撗跄?98%聚蔗糖70
白介2受體(IL2R)ELISA試劑盒3-甲基-2-并噻唑酮腙鹽鹽，合 98%4-叔丁基芐 99%碳胍(>98%,BR)
白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒酚試劑 AR,98.0%2-氨基甲叔丁酯 97%六次甲基四(>99%，BC)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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