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詳細(xì)介紹
英文名稱：TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC)
產(chǎn)品規(guī)格：20T
發(fā)貨周期：1～3天
本試劑盒應(yīng)用范圍廣，可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。 細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí)，會激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder。 |
TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（FITC）可以用來檢測組織細(xì)胞在凋亡晚期過程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況。其原理是在末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT）的作用下，在基因組DNA斷裂時(shí)暴露出的3′-羥基（3′-OH）末端摻入FITC-12-dUTP，從而可以用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測。
本試劑盒對標(biāo)記反應(yīng)進(jìn)行了優(yōu)化，采用最佳比例的FITC-12-dUTP和未標(biāo)記dNTP進(jìn)行3’-OH末端的核苷酸摻入，使得同一個(gè)斷裂的DNA片段末端可以形成更長的“標(biāo)記尾巴"。該“標(biāo)記尾巴"減少了相鄰摻入dNTP上標(biāo)記基團(tuán)的空間位阻，增加每個(gè)斷裂片段上的熒光基團(tuán)數(shù)目，降低熒光基團(tuán)相鄰后可能造成的聚集和淬滅，從而提高檢測靈敏度，減少非特異性反應(yīng)。
試劑盒組份：
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl
儲存條件：-20℃，有效期一年。
注意事項(xiàng)：
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
生長分化因子11(GDF11)elisa試劑盒英文名稱：GDF11 ELISA Kit胞苷尿苷鳥苷結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
生長分化因子1(GDF1)elisa試劑盒英文名稱：GDF1 ELISA Kit原腸胚雙向形成相關(guān)蛋白抗體包裝5g
滲透性糖蛋白(Pgp)elisa試劑盒英文名稱：Pgp ELISA Kit分裂周期蛋白CDC123抗體包裝100g
腎足蛋白(NPHN)elisa試劑盒英文名稱：NPHN ELISA Kit神經(jīng)蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體包裝25g
腎臟腦蛋白(KIBRA)elisa試劑盒英文名稱：KIBRA ELISA Kit趨化樣因子超家族成員3抗體包裝100ml
腎損傷分子1(Kim1)elisa試劑盒英文名稱：Kim1 ELISA Kit染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體包裝25ml
腎(REN)elisa試劑盒英文名稱：REN ELISA Kit冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白抗體包裝5ml
腎上腺能受體β3(ADRβ3)elisa試劑盒英文名稱：ADRβ3 ELISA Kit連接相關(guān)蛋白1抗體包裝25g
腎上腺能受體β2(ADRβ2)elisa試劑盒英文名稱：ADRβ2 ELISA Kit連接相關(guān)蛋白2抗體包裝5g
腎上腺能受體β1(ADRβ1)elisa試劑盒英文名稱：ADRβ1 ELISA Kit磷化周期依賴性激5抗體包裝250mg
腎上腺能受體α1A(ADRα1A)elisa試劑盒英文名稱：ADRα1A ELISA Kit異戊烯半胱羧基轉(zhuǎn)移抗體包裝1g
神經(jīng)源3(NEUROG3)elisa試劑盒英文名稱：NEUROG3 ELISA Kit鳥嘌呤核苷交換因子CLLD7抗體包裝5g
神經(jīng)元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)elisa試劑盒英文名稱：NPTX1 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員4抗體包裝25g
神經(jīng)元特異性烯化(NSE)elisa試劑盒英文名稱：NSE ELISA Kit趨化樣因子超家族成員7抗體包裝5g
神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)elisa試劑盒英文名稱：NT4 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員5抗體包裝5g
蛹假交替單胞菌Pseudoalteromonas│undina 質(zhì)量規(guī)格：純度98%轉(zhuǎn)錄因子E2F1 elisa試劑盒紫莖女貞苷B;Ligupurpurosi
玫瑰色庫克菌Kocuria│roseus 質(zhì)量規(guī)格：純度大于98%,USPgrade轉(zhuǎn)錄因子AP-1 elisa試劑盒紫莖女貞苷A ;Ligupurpuros
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：含量測定,HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品轉(zhuǎn)化生長因子-β誘導(dǎo)蛋白IG-H3試劑盒左旋肉堿; L(-)-Carnitine
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(FITC)乙烯利
其他2-氯乙基磷；乙烯磷；艾斯勒爾；玉米健壯；(2-氯乙基)膦；2-氯乙基膦
英文名稱：Ethephon
其他英文名稱：2-Chloroethylphosphonic acid；Chlorethephon
產(chǎn)品規(guī)格：AR，85%
包 裝： 500克
CAS號：16672-87-0
C2H6ClO3P=144.49
級別：AR
含量：≥85.0%
度（以HC1計(jì)）：≤10%
熔點(diǎn)：74～75℃
干燥失重：≤0.50%
性狀：結(jié)晶性粉末。易溶于酮，微溶于，不溶于水。毒性：小鼠急性經(jīng)皮LD50為1000毫克/公斤。小鼠腹腔內(nèi)注射LD50150毫克/公斤。鯉魚LC50 (48小時(shí))＞40ppm。對蜜蜂無毒
用途：生化研究。植物生長及分析試劑。3-吲哚乙以及3-吲哚乙醛、3-吲哚乙腈、抗壞血等茁長類物質(zhì)在自然界天然存在，3-吲哚乙在植物體內(nèi)生物合成的前體是色。茁長的基本作用在于調(diào)節(jié)植物的生長，不僅能促進(jìn)生長，而且具有抑制生長和器官建成的作用。茁長在植物細(xì)胞內(nèi)不僅以游離狀態(tài)存在，還可以與生物高分子等牢固結(jié)合的束縛型茁長存在，也有與特殊物質(zhì)形成結(jié)合物的茁長，例如吲哚乙?；扉T冬酰胺、吲哚乙阿戊糖和吲哚乙酰葡萄糖等。這可能是茁長在細(xì)胞內(nèi)的一種貯藏方式，也是解除過剩茁長毒害的方式
保存：RT，避光
操作規(guī)程：
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
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