特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加) |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
FGF-10(Rat fibroblast growth factor-10,FGF-10 )ELISA Kit 大鼠成纖維細(xì)胞生長因子10Multi-class antibodies: 48T
Stanniocalcin 1 斯鈣抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml
15-LO/LOX ELISA Kit 大鼠15脂加氧 96T
Nidogen2 骨巢蛋白抗體 0.2ml
Phospho-Bcl-2(Thr129) 磷化Bcl-2抗體 0.1ml
Stanniocalcin 1 斯鈣抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
BMG/ Beta2-MG(Human Beta2-microglobulin) ELISA Kit 人β2微球蛋白Multi-class antibodies: 48T
Phospho-MK6 (Ser202) 磷化原活化蛋白激MKK6抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Hsp93 植物熱休克蛋白93抗體 1ml
PM-Scl/PM-1(Human polymyositis-sclerosis antibody) ELISA Kit 人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體 96T
PTF1A 胰腺特異轉(zhuǎn)錄因子PTF1A抗體 0.1ml
CDC2L5 細(xì)胞分裂周期2樣蛋白激5抗體 0.2ml
Phospho-MK6 (Ser202) 磷化原活化蛋白激MKK6抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit rat IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
Glutaredoxin 1 谷氧還蛋白/巰基轉(zhuǎn)移抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APOB48R 載脂蛋白B受體抗體 0.2ml
IL-7/FITC 熒光標(biāo)記白介7抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG 兔抗長爪沙鼠IgG 1mg
PSD93/FITC 熒光標(biāo)記突觸后密度蛋白93抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
莫氏立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒腐生葡萄球菌種屬: Staphylococcus│saprophyticus提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物;凍結(jié)物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 致病菌檢測(cè)芯片培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
釀酒酵母種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 酒精。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽胞桿菌東北亞種種屬: Bacillus│thuringiensis subsp. tohokuensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30-32℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
球蛋白D(IgD)ELISA試劑盒鉍 99.999%,1-6mm719(202)是高等級(jí)凝膠強(qiáng)Ⅱ型陰離子交換樹脂咖啡
球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒鉍 99.9999%,1-6mmAMBERLITE IRA402 CL陰離子交換樹脂 型咖啡(標(biāo)準(zhǔn)品)
球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒鉍粉 99.99% metals basis,200目D751 大孔乙烯系螯合型離子交換樹脂咖啡(進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品)
核糖核(Irna)ELISA試劑盒硫化鎘 99.999%硝鋁 九合物 CP,98.0%硫新霉
反應(yīng)性生長(irGH)ELISA試劑盒鎘 99.999%,granular硝鉻 99.95% metals basis硫新霉(標(biāo)準(zhǔn)品)
糜蛋白(Chymase)ELISA試劑盒碲化鎘 99.999%,5N硝鎂,六 CP,98%鹽海拉明
錳超氧化物歧化(SOD2)ELISA試劑盒碲化鎘 99.9999%,6N2,3-二 99%鹽海拉明(標(biāo)準(zhǔn)品)
鎂依賴性1(MDP1)ELISA試劑盒銦 99.999%碳鈰 99.9% metals basis聚肌苷
美洲商陸(PWM)ELISA試劑盒銦 SP氟化鉺 99.99% metals basis米屈肼
美麗線蟲凋亡基因(CED-3)ELISA試劑盒鉛 flakes,SP化銪(III),六 99.9% metals basis米屈肼(標(biāo)準(zhǔn)品)
錨蛋白B(Ank-B)ELISA試劑盒鉛 99.99%,powder硝銪(III),六 99.9% REO卡拉膠
擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因(ATM)ELISA試劑盒鉛 99.999%,粒狀,1-3mm氟化鈥(III) 無,粉末, 99.99% metals basis普侖司特
麥考酚(MPA)ELISA試劑盒質(zhì)鉛標(biāo)樣 1.0mg/l,分析標(biāo)準(zhǔn)品硝鑭 99.9% metals basis美托洛爾
麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA試劑盒高純硫 99.99% metals basis化釹(Ⅲ) 99.9% metals basis美托洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)
離子胞內(nèi)通道蛋白4(CLIC4)ELISA試劑盒高純硫 99.999% metals basis氧化銩 99.9% metals basis阿拉伯膠
卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒高純硫 分析標(biāo)準(zhǔn)品氧化銩 99.99% metals basis氨地平