Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒正在出售的產(chǎn)品：生物素標(biāo)記的小鼠抗人IgM替莫唑Human
辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗人IgM托瑞米芬Human, Mouse, Rat
FITC標(biāo)記的小鼠抗人IgM拓?fù)涮婵蝶}鹽Human, Mouse, Rat
Cy3標(biāo)記的小鼠抗人IgM維酰酚Human, Mouse, Rat
Cy5標(biāo)記的小鼠抗人IgM維羅非尼,RG7204Human, Mouse

中文名稱：Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

英文名稱：Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格：20次|50次

發(fā)貨周期：1～3天

試劑盒組份：

Annexin V-FITC——————100μl

Annexin V-FITC結(jié)合液———12ml

碘化丙啶染色液——————220μl

Annexin是一類廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷脂結(jié)合蛋白，參與細(xì)胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。但僅Annexin V被報道可以調(diào)控一些PKC的活性。

Annexin V選擇性結(jié)合磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine，簡稱PS)。磷脂酰絲氨酸主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè)。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期，不同類型的細(xì)胞都會把磷脂酰絲氨酸外翻到細(xì)胞表面，即細(xì)胞膜外側(cè)。磷脂酰絲氨酸暴露到細(xì)胞表面后會促進(jìn)凝血和炎癥反應(yīng)。而Annexin V和外翻到細(xì)胞表面的磷脂酰絲氨酸結(jié)合后可以阻斷磷脂酰絲氨酸的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性。

用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標(biāo)記的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡單而直接地檢測到磷脂酰絲氨酸的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。

本試劑盒還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液，碘化丙啶可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，呈現(xiàn)紅色熒光。對于壞死細(xì)胞，由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失，Annexin V-FITC可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi)，與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲氨酸結(jié)合，從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光。

本試劑盒的流式檢測效果參考圖1和圖2，熒光顯微鏡檢測效果參考圖3。

1.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡的效果圖。Jurkat細(xì)胞未經(jīng)處理(A)或用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時(B)后，用本試劑盒染色，然后用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞的散射和熒光檢測。從圖中可以看出，經(jīng)過凋亡誘導(dǎo)劑喜樹堿處理后的細(xì)胞，其Annexin V-FITC染色陽性并且PI染色陰性的細(xì)胞，即凋亡細(xì)胞，明顯增加(B圖的右下象限)，Annexin V-FITC和PI染色雙陽性的細(xì)胞，即壞死細(xì)胞，也有所增加(B圖的右上象限)。圖中Annexin V-FITC染色陰性PI染色陽性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B圖的左上象限)出現(xiàn)的細(xì)胞點(diǎn)是許可范圍內(nèi)的檢測誤差。實測數(shù)據(jù)可能會因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。

2.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測效果驗證圖。Jurkat細(xì)胞用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時后，未經(jīng)染色(A)、僅用本試劑盒中的PI進(jìn)行染色(B)、僅用本試劑盒中的Annexin V-FITC進(jìn)行染色(C)、用本試劑盒中的Annexin V-FITC和PI進(jìn)行雙染(D)。從圖中可以看出，未經(jīng)染色的是雙陰性細(xì)胞(A)，僅PI染色后出現(xiàn)了預(yù)期的PI染色陽性的細(xì)胞，僅Annexin V-FITC染色出現(xiàn)了預(yù)期的Annexin V-FITC染色陽性的細(xì)胞，Annexin V-FITC和PI雙染出現(xiàn)了預(yù)期的僅Annexin V-FITC染色陽性的凋亡細(xì)胞和雙陽性的壞死細(xì)胞。出現(xiàn)的非預(yù)期的細(xì)胞點(diǎn)*在許可的誤差范圍內(nèi)。實測數(shù)據(jù)可能會因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。

儲存條件：4℃避光，有效期6個月。
注意事項：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

操作規(guī)程：

1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)

血管生長素(ANG)elisa試劑盒英文名稱：ANG ELISA KitAIMP2抗體包裝25g

血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)elisa試劑盒英文名稱：ANGPTL4 ELISA Kit乙酰膽堿酶抗體包裝5g

血管生成素Ⅱ(ANGⅡ)elisa試劑盒英文名稱：ANGⅡ ELISA Kit5-氨基乙酰酸合酶1抗體包裝10g

血管生成素4(ANG-4)elisa試劑盒英文名稱：ANG-4 ELISA Kit防御素α1/3抗體包裝50g

血管生成素2(ANG-2)elisa試劑盒英文名稱：ANG-2 ELISA KitABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體包裝1g

血管生成素1(ANG-1)elisa試劑盒英文名稱：ANG-1 ELISA Kit植物延長蛋白（擬南芥）包裝5g

血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)elisa試劑盒英文名稱：VCAM-1/CD106 ELISA KitA-Raf抗體包裝1g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)elisa試劑盒英文名稱：VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit磷酸化A-Raf抗體包裝1g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)elisa試劑盒英文名稱：VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit紅腺苷脫氨酶3抗體包裝5g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)elisa試劑盒英文名稱：VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit雄激素結(jié)合蛋白抗體包裝10g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)elisa試劑盒英文名稱：VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit肝再生增強(qiáng)因子抗體包裝50g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)elisa試劑盒英文名稱：VEGF-D ELISA KitAPP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝25g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)elisa試劑盒英文名稱：VEGF-C ELISA Kit胎蛋白單克隆抗體（包被）包裝5g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)elisa試劑盒英文名稱：VEGF-B ELISA Kit胎蛋白單克隆抗體(檢測)包裝1g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)elisa試劑盒英文名稱：VEGF ELISA KitADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體包裝250mg

粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體白介素4(IL4)KU-55933 (ATM Kinase Inhibitor) is a potent and specific ATM inhibitor with IC50
Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒轉(zhuǎn)移核糖核酸（酵母）

其他9014-25-9

英文名稱：t-RNA

其他英文名稱：t-Ribonucleic acid(yeast)；Transfer RNA；Ribonucleic acid transfer from baker's yeast

產(chǎn)品規(guī)格：BR，15～20A260單位/mg

包　　裝： 100毫克

CAS號：9014-25-9

級別：BR

含量：15～20A260單位/mg

電泳試驗：合格

性狀：灰色至灰褐色粉末

用途：生化研究。蛋白質(zhì)生物合成中特異地轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸，并保證遺傳信息從核酸到蛋白質(zhì)準(zhǔn)確傳遞的一類小分子核糖核酸。每種氨基酸有一種以上相應(yīng)的tRNA，每個細(xì)胞約有40～70種不同的tRNA，分別由72～93個核苷酸組成，其中5％～20％為稀有堿基，相對分子量平均：為25 000，沉降系數(shù)4S。不同tRNA的一級結(jié)構(gòu)不同，但有共同的三葉草二級結(jié)構(gòu)特征。其中氨基酸臂上3′端-C-C-A-OH是結(jié)合氨基酸的位點(diǎn)，氨基酸的?；谔禺惖陌被RNA合成酶催化下附著于相應(yīng)tRNA3′端腺苷的3′羥基上；反密碼環(huán)中三個連續(xù)的核苷酸構(gòu)成反密碼子與核糖體上mRNA的密碼子互補(bǔ)結(jié)合，使氨基酸準(zhǔn)確對號入座合成多肽鏈。通過這種密碼-反密碼-氨基酸之間的對應(yīng)關(guān)系，保證了核酸到蛋白質(zhì)的信息準(zhǔn)確傳遞。tRNA起了重要的接合(adaptor)作用

保存：2～8℃