詳細介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:AnnexinV-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒
英文名稱:Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
產品規(guī)格:20T
發(fā)貨周期:1~3天
Annexin V-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒是用熒光素APC標記的Annexin V作為探針,來檢測細胞早期凋亡的發(fā)生,可用流式細胞儀或其他熒光檢測設備進行檢測。 其檢測原理為:在正常的活細胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphotidylserine,PS)位于細胞膜的內側,但在早期凋亡的細胞中,PS從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面,暴露在細胞外環(huán)境中。Annexin-V(膜聯蛋白-V)是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結合蛋白,能與PS高親和力結合。可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。 |
另外,本試劑盒中提供的7-AAD可用來區(qū)分存活的早期細胞和壞死或晚期凋亡細胞。7-AAD是一種核酸染料,同PI有著相似的熒光特性,但其發(fā)射光譜較PI窄,對其他檢測通道的干擾更小,在多色熒光分析中是PI的最佳替代品,可與Annexin V聯合使用。該染料不能透過正常細胞或早期凋亡細胞的完整的細胞膜,但可穿透晚期凋亡細胞或者壞死細胞并與其內的DNA結合。因此將Annexin V-APC與7-AAD聯合使用時,7-AAD則被排除在活細胞(Annexin V-/7-AAD-)和早期凋亡細胞(Annexin V+/7-AAD-)之外,而晚期凋亡細胞和壞死細胞同時被Annexin V-APC和7-AAD結合染色呈現雙陽性(Annexin V+/7-AAD+)。
試劑盒組份:
重組人Annexin V/APC*(rh Annexin V/APC)———100μl
7-AAD Viability Staining Solution——————100μl
1×Binding buffer——————————————10ml
儲存條件:4℃,有效期一年。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
乳腺癌易感蛋白2(BRCA2)elisa試劑盒英文名稱:BRCA2 ELISA Kit分裂周期樣激2抗體包裝25g
乳鐵傳遞蛋白(LTF)elisa試劑盒英文名稱:LTF ELISA Kit分裂周期樣激3抗體包裝5g
乳脫氫B(LDHB)elisa試劑盒英文名稱:LDHB ELISA Kit17號染色體開放閱讀框49抗體包裝1g
乳過氧化物(LPO)elisa試劑盒英文名稱:LPO ELISA Kit17號染色體開放閱讀框53抗體包裝25g
肉毒堿棕櫚酰基轉移1A(CPT1A)elisa試劑盒英文名稱:CPT1A ELISA Kit17號染色體開放閱讀框57抗體包裝5g
肉毒堿乙酰轉移(CRAT)elisa試劑盒英文名稱:CRAT ELISA Kit17號染色體開放閱讀框64抗體包裝1g
融合蛋白(FUS)elisa試劑盒英文名稱:FUS ELISA Kit17號染色體開放閱讀框66抗體包裝250mg
溶質載體家族30成員7(SLC30A7)elisa試劑盒英文名稱:SLC30A7 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框74抗體包裝1g
溶質載體家族30成員6(SLC30A6)elisa試劑盒英文名稱:SLC30A6 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框75抗體包裝250mg
溶質載體家族30成員5(SLC30A5)elisa試劑盒英文名稱:SLC30A5 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框77抗體包裝5g
溶質載體家族30成員4(SLC30A4)elisa試劑盒英文名稱:SLC30A4 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框78抗體包裝1g
溶質載體家族30成員3(SLC30A3)elisa試劑盒英文名稱:SLC30A3 ELISA Kit維調節(jié)核基質相關蛋白抗體包裝5g
溶質載體家族30成員10(SLC30A10)elisa試劑盒英文名稱:SLC30A10 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框42抗體包裝1g
溶質載體家族30成員1(SLC30A1)elisa試劑盒英文名稱:SLC30A1 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框97抗體包裝250mg
溶血卵磷脂酰基轉移4(LPCAT4)elisa試劑盒英文名稱:LPCAT4 ELISA Kit貓眼綜合征染色體候選基因1抗體包裝100g
猴頭菌Hericium│erinaceus (Bull.) Pers. 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品轉化生長因子β1試劑盒蔗糖;Sucrose
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質量規(guī)格:945-1030 ug /mg,二物轉化生長因子α試劑盒正丁基酞;3-n-Butylphath
結核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質量規(guī)格:效價測定轉谷酰2C多肽試劑盒知母皂苷B;Anemarsaponin
AnnexinV-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒乙維生E
其他維生E醋酯;維生E乙酯;[2R-[2R*(4R*,8R*)]]-3,4-二氫-2,5,7,8-四甲基-2-(4,8,12-基三癸基)-2H-1-并呋喃-6-酚乙酯;D-α-生育酚醋酯;α-生育酚乙酯;醋生育酚;維他命E醋鹽
英文名稱:Vitamin E acetate
其他英文名稱:(+)-α-Tocopherol acetate;(±)-5,7,8-Trimethyltocol;2,5,7,8-Tetramethyl-2-(4′,8′,12′-trimethyltridecyl)-6-chromanol
產品規(guī)格:BR,98%
包裝:25克/100克/250克
CAS號:58-95-7
C31H52O3=472.74
級別:BR
含量:≥98.0%
鉛:≤0.0002%
同系物:≤2.5%
溶液澄清度:≤0.5號濁度標準液
重金屬:≤0.001%
硫鹽:≤0.01%
干燥失重:≤5.0%
吸收系數(E1%1㎝):406~436
性狀:粉末。微有噻唑氣味。味苦。對光敏感。暴露于空氣中易吸濕。正??諝鉂穸戎形?/span>1mol水成水合物。248℃分解。1g約溶于1ml水、18ml甘油、100ml 95%乙、315ml無水乙,易溶于甲,溶于二、、己烷和。1%(w/V)水溶液pH為3.13;0.1%(w/V)水溶液pH為3.58。半數致死量(小鼠,經口)8224mg/kg。
用途:生化研究。醫(yī)藥。熒光和磷光光度分析磷。熒光測定汞
保存:RT,避光