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詳細(xì)介紹
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
小鼠胃黏膜成纖維細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X1823 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞 | OCM 1A人眼膜絡(luò)黑色瘤細(xì)胞 |
缺氧誘導(dǎo)因子1β/HIF-1β重組兔單克隆抗體 | Cy5.5標(biāo)記的受體激活蛋白激C1抗體 |
NCI-H2228人肺癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的12脂氧合抗體 |
NCI-H23人肺癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的輔細(xì)胞色C還原復(fù)合抗體 |
NCI-H2452人間皮瘤細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的細(xì)胞角蛋白81抗體 |
NCI-H292人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移) | Cy5.5標(biāo)記的乳腺癌增強(qiáng)蛋白抗體 |
NCI-H295R人腎上腺皮質(zhì)細(xì)腺癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的大腸埃希菌菌體蛋白抗體 |
NCI-H358人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的血管內(nèi)皮生長因子受體1抗體 |
NCI-H3122人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的IL-1相關(guān)Ig受體抗體 |
NCI-H446人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白3抗體 |
NCI-H460 [H460] 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體 |
NCI-H508人結(jié)腸直腸腺癌細(xì)胞 | 小鼠胃黏膜成纖維細(xì)胞Cy5.5標(biāo)記的磷化整合β2/Integrin β2抗體 |
NCI-H520人肺鱗癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白85B抗體 |
NCI-H522 人非小細(xì)胞肺癌腺癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的Rab11家族相互作用蛋白2抗體 |
OCI-LY3人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的SYF2蛋白抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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