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禽副粘病毒2型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-14 11:07:27瀏覽次數(shù):175

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號(hào) FS-P013447 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
禽副粘病毒2型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:白色食藻菌動(dòng)物垂體組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒
血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體動(dòng)物前列腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒
4180-23-8茴香腦動(dòng)物生殖組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒
3279-54-7磷酸苯二鈉動(dòng)物鱗片(Scales)組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒

詳細(xì)介紹

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

禽副粘病毒2型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

50次

FS-P013447

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

QQ截圖20201022162313.png 

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。

2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,

多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),

一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

CD3(Rat Cluster of differentiation 3,CD3) ELISA Kit 大鼠CD3分子Multi-class antibodies: 48T

 STAT3 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat  human IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的羊抗人IgG  0.1ml

CP/CER(Mouse Ceruloplasmin) ELISA Kit 小鼠銅藍(lán)蛋白 96T

Neurogenin 2 神經(jīng)元2抗體 0.1ml

BACH1 癌易感基因相互作用蛋白1抗體 0.1ml

 STAT3 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

HLA-G(Human leukocyte antigen G) ELISA Kit 人類白細(xì)胞抗原GMulti-class antibodies: 48T

 RAD51C 癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh HAND2 心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體  0.1ml

Alpha2-PI(Mouse Alpha2-plasmin inhititor) ELISA Kit 小鼠α2纖溶抑制物 96T

PTOV1 前列腺高表達(dá)蛋白1抗體 0.2ml

BCAR1 癌抗雌耐藥蛋白1 0.2ml

 RAD51C 癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  rat IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml

VP3 Goose parvovirus 鵝細(xì)小病毒GPV抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh APM2 脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體  0.2ml

 IL-12/FITC 熒光標(biāo)記抗白介12抗體(人)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human sIgA/FITC FITC標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA  100ug

 PTEN/MMAC1 /FITC 熒光標(biāo)記一種抑制基因抗體(C端)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
禽副粘病毒2型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒香菇種屬: Lentinula│edodes提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用菌培養(yǎng)基: 0017生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

巨大芽孢桿菌種屬: Bacillus│megaterium分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0033生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

白淺灰鏈霉菌種屬: Streptomyces│albogriseolus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生新霉復(fù)合體培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

皮氏羅爾斯通氏菌種屬: Ralstonia│pickettii提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

皮質(zhì)酮(CORT)ELISA試劑盒異戊 分子生物學(xué)級(jí),>99%(GC)糠 98%泊酚

皮質(zhì)-3(Cortxin-3)ELISA試劑盒異戊 GCS,≥99.8% (GC)呋喃 >99.0%(GC)鹽雷洛昔芬

皮質(zhì)類固結(jié)合球蛋白(CBG)ELISA試劑盒癸甲酯 ≥99%呋喃 CP福多斯坦

皮質(zhì)(Cortisol)ELISA試劑盒椰子 98%呋喃 99.5%福多斯坦(標(biāo)準(zhǔn)品)

皮膚相關(guān)抗原(CLA)ELISA試劑盒壬 CP,95%呋喃 standard for GC,≥99.5% (GC) 利塞膦

皮膚蛋白(DPT)ELISA試劑盒壬 97%1-甲基吡咯 99%利塞膦(標(biāo)準(zhǔn)品)

皮膚T虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒壬 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5% (GC)2-甲基四 99%利塞膦鈉

皮動(dòng)蛋白(CTTN)ELISA試劑盒壬色標(biāo)Standard for GC ,>99% (GC)2-甲基四 Standard for GC, ≥99.5% (GC)利塞膦鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)

胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA試劑盒壬 98%酮 40%溶液甲利扎曲普坦;利扎曲坦

泡狀過表達(dá)癌癥促生存蛋白1(VOPP1/ECOP/GASP)ELISA試劑盒1-辛 99%1,3-二 98%甲利扎曲普坦;利扎曲普坦(標(biāo)準(zhǔn)品)

膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA試劑盒1-辛 97%吡咯 standard for GC,>99.7%(GC)

膀胱癌抗原(UBC)ELISA試劑盒正辛 ≥98%, FG吡咯 CP羅紅霉

排序連接蛋白3(SNX3)ELISA試劑盒1-辛 ≥92%, FCC吡咯 99%羅紅霉(標(biāo)準(zhǔn)品)

帕金森氏病2Parkin(Park2)ELISA試劑盒1-辛 natural, ≥92%, FCC(±)-四氫糠 97%鹽司來吉蘭

偶聯(lián)因子6(CF6)ELISA試劑盒丁酯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)N-甲基-3-氨基吡唑 97%3-氮雜雙環(huán)【3.3.0】辛鹽鹽

紐蛋白(VCL)ELISA試劑盒丁酯 99%2-氨基-3,5-二溴吡 97%鹽舍曲林


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