培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
Z-LEHD-FMK是一種高效caspase-9的特異的和不可逆的小分子抑制劑??梢砸种朴蒀aspase 9激活導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡。Z-LEHD-FMK是methyl(4S)-5-[[(2S)-1-[[(3S)-5-fluoro-1-methoxy-1,4-dioxopentan-3-yl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-[[(2S)-4-methyl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)pentanoyl]amino]-5-oxopentanoate,即C32H43FN6O10,分子量為690.72。 |
Z-LEHD-FMK采用進(jìn)口高品質(zhì)原料分裝配制,濃度為1mM。本產(chǎn)品適用于需要用到Z-LEHD-FMK的各種實(shí)驗(yàn),請(qǐng)根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行配制和使用,具體請(qǐng)參考相關(guān)文獻(xiàn)或?qū)嶒?yàn)指南。
儲(chǔ)存條件:-20℃保存。
有效期:一年。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Carisoprodol(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Streptozocin柯薩奇病A16型聚合3D包裝25g
Carmustine(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sulconazle Nitrate睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體包裝5g
Carvedilol(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sulconazle Nitrate角蛋白16抗體包裝1g
Chlormadinone Acetate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sunitinib base4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框17抗體包裝25g
Ciclesonide(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sunitinib base質(zhì)脆性X智力低下蛋白結(jié)合蛋白2抗體包裝100mg
Cilostazol(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sunitinib Malate胸腺基質(zhì)淋巴生成受體抗體包裝25mg
Citalopram HBr(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sunitinib Malate角蛋白12抗體包裝100g
Corticosterone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Suprofen谷半胱γ合成抗體包裝25g
Cortisone acetate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tacrolimus /FK506 monohydrate表面趨化因子受體3抗體包裝500g
Cortisone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tacrolimus /FK506 monohydrate補(bǔ)體C2抗體包裝25g
Cyclophosphamide(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tamoxifen Citrate 造血干抗原CD133抗體包裝1g
Cyclosporin A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tamoxifen Citrate 內(nèi)受體抗體包裝5g
Cyproterone acetate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TandutinibCD20抗體包裝1g
Cytarabine(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TandutinibCD24抗體包裝1g
D(+)-阿拉伯糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Teicoplanin 白介2受體a鏈/IL-2RA抗體包裝250mg
易變?nèi)墙湍?/span>Trigonopsis│variabilis 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR血吸蟲(chóng)抗原elisa試劑盒關(guān)附;Guan-fu base A
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,用于培養(yǎng),藥劑造模血吸蟲(chóng)抗體試劑盒旋復(fù)花內(nèi)酯;Britannilacton
赤桿菌Erythrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血吸蟲(chóng)抗體試劑盒8-香葉草氧基補(bǔ)骨脂;8-Gerany
Caspase 9抑制劑氧化鋁
其他 鋁氧;三氧化二鋁;剛玉;金剛砂;礬土;鋁氧粉
英文名稱: Aluminum oxide
其他英文名稱: alpha-Alumina
產(chǎn)品規(guī)格: SP
包裝:25克
產(chǎn)品規(guī)格: 4N
包裝:100克
產(chǎn)品規(guī)格: AR
包裝:500克
CAS號(hào):1344-28-1
Al2O3=101.96
級(jí)別:SP
氯化物:≤0.008%
硫鹽:≤0.005%
硝鹽:≤0.001%
灼燒失量:≤2.0%
陽(yáng)離子:合格
級(jí)別:4N
級(jí)別:AR
重金屬:≤0.005%
氯化物:≤0.01%
硫鹽:≤0.05%
水溶解物:≤0.5%
灼燒失量:≤5.0%
堿金屬及堿士金屬:≤0.5%
鐵:≤0.01%
硅鹽:合格
性狀:結(jié)晶性粉末。無(wú)臭。無(wú)味。質(zhì)極硬。易吸潮而不潮解。溶于濃硫,緩慢溶于堿液中形成氫氧化物,幾乎不溶于水及非極性有機(jī)溶劑。相對(duì)密度(d204)4.0。熔點(diǎn)約2000℃。
用途:生化研究。用作分析試劑。有機(jī)溶劑的脫水。吸附劑。有機(jī)反應(yīng)催化劑。研磨劑。拋光劑
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