培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
Indoximod(D-1MT,NLG8189)是吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)通路的抑制劑,Ki值為19μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:110117-83-4 別名:NLG-8189;1-Methyl-D-tryptophan 純度:98.98% 分子量:218.25 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
美澳型核果褐腐病菌甲型流感病血凝抗體Human PTPN7 ELISA Kit幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒
海境芽孢桿菌甲型流感病血凝抗體Human PTPN9 ELISA Kit幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒
大腸埃希菌整合αVβ5抗體Human PTMS ELISA Kit幽門螺桿菌相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒
鄰單胞菌屬*干擾調(diào)節(jié)因子1抗體Human PTPN11(Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 11) ELISA Kit優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒
葡萄座腔菌白介6Human PTPRE ELISA Kit硬骨(SOST)ELISA試劑盒
大腸埃希菌γ干擾誘導(dǎo)蛋白16抗體Human PTPN23 ELISA Kit印度猬因子(IHH)ELISA試劑盒
動物源細(xì)菌耐藥性檢測板-金黃色葡菌球菌整合αVβ1抗體Human PTPN18 ELISA Kit隱熱蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)ELISA試劑盒
矩圓黑盤孢白介-20抗體Human PTPN22( Protein tyrosine phosphatase, non-receptor type 22) ELISA Kit吲哚2,3-雙加氧(IDO)ELISA試劑盒
卡爾斯伯酵母干擾相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)因子2抗體Human PTPN2(Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 2) ELISA Kit音猬因子N端(Shh-N)ELISA試劑盒
黃曲霉白介-1受體相關(guān)激2抗體Human PTPN5 ELISA Kit音猬因子(SHH)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化胰島受體β抗體Human PTPN4 ELISA Kit抑制β-B(Inhbb)ELISA試劑盒
桔青霉磷化胰島受體β抗體Human PTPN9 ELISA Kit抑制β-A(INHBA)ELISA試劑盒
滅蚊鏈霉菌整合alpha E2 抗體Human PTPN7 ELISA Kit抑制B(INH-B)ELISA試劑盒
糞腸球菌(糞鏈球菌)整合αV抗體Human PTMS ELISA Kit抑制A(INH-A)ELISA試劑盒
星座鏈球菌星座亞種免疫球蛋白結(jié)合蛋白1抗體Human PTPRE ELISA Kit抑制(INH)ELISA試劑盒
深綠木霉胰島樣生長因子1受體抗體Human PTAFR ELISA Kit抑肽(AP)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)地奧司明
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)貝母辛
副豬嗜血桿菌Haemophilus│parasuis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)白花前胡
IDO通路抑制劑(Indoximod)酪蛋白基
其他 酪蛋白水解物
英文名稱: Casamino acid
產(chǎn)品規(guī)格: BR
包裝:100克/500克
CAS號:9000-71-9
級別:BR
Total nitrogen:≥8.7%
Amino nitrogen:≥5.3%
Salmonella:None detected
Moisture:≤4.0%
Ash:≤33.6%
性狀:粉末,極易吸濕。易溶于熱的堿性水溶液
用途:生化研究。配制培養(yǎng)基用
保存:RT