產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
淋巴細(xì)胞分離液1.084 | Lymphocyte separation medium1.084 | 100ml | 1~3天 |
商品介紹:
淋巴細(xì)胞分離液(Lymphocyte Separation Medium 1.084,簡(jiǎn)稱LSM-1.084)是一種無菌的即用型分離液,基于B?yum的Ficoll-甲泛影鈉溶液做過一些改良,使得操作簡(jiǎn)單快速且分離效率更高。本品是無菌的聚蔗糖Ficoll/泛影酸鈉混合溶液,密度為1.084 g/ml,內(nèi)毒素含量很低(<0.12 EU/ml),是在嚴(yán)格控制的環(huán)境下加工的,條件符合ISO13485:2003標(biāo)準(zhǔn)和GMP認(rèn)證。相對(duì)于密度為1.077 g/ml的人淋巴細(xì)胞分離液,本品適用于分離更高密度的人單個(gè)核細(xì)胞,包括外周血,臍帶血以及骨髓瘤來源的組織樣本。還適用于分離大小鼠血細(xì)胞,正因?yàn)閲X動(dòng)物的淋巴細(xì)胞密度稍高于人淋巴細(xì)胞。 |
工作原理
去纖維蛋白或抗凝人血以1:1的比例用無菌生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋,小心的添加在分離液上層(不要混雜在一起),之后離心30-40min。離心過程中,差速遷移使其終形成幾個(gè)不同的細(xì)胞分層:
①聚集在管底的顆粒主要是Ficoll 聚集的紅細(xì)胞以及沉淀物;
②緊挨著上面一層的顆粒主要是粒細(xì)胞,其處于LSM-1.084溶液的滲透壓臨界,具有足夠高的密度遷移穿過LSM-1.084溶液層。
③單個(gè)核細(xì)胞分布在血漿和LSM-1.084分離液的中間層,還包括一些沉降系數(shù)低(密度低)的顆粒,如血小板。
淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞和血小板不具有足夠高的密度穿透LSM-1.084分離液層,因此這些細(xì)胞在血漿和LSM-1.084分離液層聚集形成一個(gè)中間分層。吸取中間層,用平衡鹽溶液短暫洗滌,以除去血小板,細(xì)胞分離介質(zhì)和血漿,就可以單個(gè)核細(xì)胞。通常情況下,分離所得的細(xì)胞中95±5%為單個(gè)核細(xì)胞,細(xì)胞存活率>90%,回收率為60±20%。
儲(chǔ)存條件:4~8℃,避光
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
磷咯萘啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TopiramateCAP1抗體包裝5g
磷喹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tozasertib,VX-680/MK-0457粒-巨噬集落激因子3抗體包裝1g
磷哌喹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Trospium chloride 表面趨化因子受體7抗體包裝250mg
磷氫鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: AG-014699色c氧化10抗體包裝5g
膦鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Carfilzomib/PR171CRTAM抗體包裝5g
硫噴妥(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: CEP-18770單核趨化蛋白4抗體包裝100ml
硫普羅寧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Managlinat Dialanetil/CS-917NK抑制性受體2DL3抗體包裝25ml
硫阿米卡星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nolatrexed dihydrochlorideCRX抗體包裝100g
硫阿托品(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PD 173074CD8抗體包裝25g
硫安普霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PH-797804磷化原癌蛋白CBL2抗體包裝500g
硫巴龍霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tifluadom/KC-5103磷化原癌蛋白CBL2抗體包裝5g
硫長(zhǎng)春堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Valacyclovir HCl磷化周期依賴激2抗體包裝25g
硫長(zhǎng)春新堿/硫基長(zhǎng)春堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Valacyclovir HCl磷化周期依賴激2抗體包裝5g
硫多粘菌B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vecuronium Bromide分裂周期蛋白25抗體包裝25g
硫(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vecuronium Bromide磷化分裂周期蛋白25抗體包裝5g
腐皮鐮孢菌Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman 質(zhì)量規(guī)格:>98%纖連蛋白試劑盒苔黑酚葡萄糖苷;Orcinolgluco
米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品纖調(diào)蛋白試劑盒太子參環(huán)肽B;Heterophyllin
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR細(xì)小病B19試劑盒土木香內(nèi)酯;Alantolactone
淋巴細(xì)胞分離液1.084胭脂紅
其他蟲紅;洋紅;卡紅;胭脂蟲紅;7-β-D-吡喃葡萄糖基-3,5,6,8-四羥基-1-甲基-9,10-二氧代-蒽-2-羧;胭脂蟲粉;洋紅色淀;洋紅色淀
英文名稱:Carmine
其他英文名稱:Alum lake of carminic acid;Cochineal;Nacarat;Natural Red 4 ;7-beta-D-Glucopyranosyl-3,5,6,8-tetrahydroxy-1-methyl-9,10-dioxo-anthracene-2-carboxylic acid
產(chǎn)品規(guī)格:FMP
包裝:10克
CAS號(hào):1390-65-4
C88H72O52AI2Ca3•4H2O=2206
級(jí)別:For microscopy
光譜鑒定:合格
性狀:鮮紅色粉末或片狀物,易磨成粉。系胭脂紅的鋁鈣色淀,溶于硼砂液,還溶于堿金屬的氫氧化物或碳鹽類成深紅色溶液,部分溶于熱水,幾乎不溶于冷水或稀
用途:生化研究。制備胭脂紅;胚胎學(xué)中作整體染色;細(xì)胞核染色;滴定溶液指示劑;顯微分析;熒光分析;染料、食物的著色等
保存:RT,避光
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。