HIF-1抑制劑(SYP-5)

操作規(guī)程：

1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)

中文名稱：HIF-1抑制劑(SYP-5)

注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性，則測(cè)定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè)，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

枯草芽孢桿菌Pichia farinosa

*紅城紅球菌Pichia farinosa

香草蘭根疾Pichia farinosa

黃綠鏈霉菌Pichia membranifaciens

拉曼被孢霉Pichia membranifaciens

毛頭鬼傘（雞腿菇）Pichia membranifaciens

解脂假絲酵母Hansenula subpelliculosa

抗生鏈霉菌Pichia membranifaciens

細(xì)鏈格孢Yarrowia lipolytica

金孢菌寄生Saccharomyces cerevisiae

大腸埃希氏菌Trichosporon cutaneum

蒼黃鏈霉菌Geotrichum candidum

雅致枝霉Saccharomyces cerevisiae

猴頭菌Saccharomyces cerevisiae

嬰兒配方乳粉 ?；?/span> Saccharomyces cerevisiae

芒果土賴芽胞桿菌Candida parapsilosis

小鼠單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫試劑盒堿性亮拉鏈蛋白BZW1抗體人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒 青蒿琥酯

小鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒

小鼠大內(nèi)皮(Big ET)免疫試劑盒Bcl2相互作用蛋白1抗體（轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白）人EJ抗體/抗甘酰tRNA合成抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒 青蒿

小鼠大動(dòng)脈平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)免疫試劑盒骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體人EJ抗體/抗甘酰tRNA合成抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒 青蒿乙
HIF-1抑制劑(SYP-5)Amberlite XAD4離子交換大孔吸附樹(shù)脂

英文名稱：Amberlite XAD4

產(chǎn)品規(guī)格：BR，20-60目

包裝：500毫升

CAS號(hào)：37380-42-0

級(jí)別：BR

Autoignition temp：800 °F

Matrix：styrene-divinylbenzene

Particle size ：20～60 mesh

Pore size：～0.98mL/g pore volume；40 ? mean pore size

Surface area：725 m2/g

Density：1.02 g/mL at 25℃(true wet)；1.08 g/mL at 25℃(skeletal)

性狀：玻璃粉，大孔酚醛系吸附樹(shù)脂。易于吸附大分子量的水溶性有機(jī)物

用途：生化研究。吸附樹(shù)脂用于去除蛋白、高分子量著色劑、有機(jī)雜質(zhì)。用于純化方面的具體應(yīng)用如下：基和生物堿類物質(zhì)的脫色、蛋白質(zhì)去苦味、載體；提取蛋白質(zhì)、多肽和動(dòng)植物有效成份；水解：脫色、除去蛋白質(zhì)、雜質(zhì)離子，糠醛等會(huì)影響口味的離子；有機(jī)：脫色（發(fā)酵法有機(jī)，如檸檬、乳）

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