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巴爾通體通用探針法熒光定量PCR試劑盒50次

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更新時間:2022-04-14 13:35:49瀏覽次數(shù):207

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013538 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
巴爾通體通用探針法熒光定量PCR試劑盒50次正在出售的產(chǎn)品:膠凍樣類芽孢桿菌細(xì)胞KUNEL測定試劑盒
523-44-4橙黃Ⅰ凍切片KUNEL測定試劑盒
紅芝石蠟切片KUNEL測定試劑盒
山茱萸苷CAS:548-37-8藍(lán)色熒光細(xì)胞核染色分析試劑盒

詳細(xì)介紹

實驗外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

巴爾通體通用探針法熒光定量PCR試劑盒50次

50次

FS-P013538

 

QQ截圖20201022162313.png 

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

Human Cyclic AMP response element binding protein,CREB ELISA Kit 人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白Multi-class antibodies: 48T

 SOD1 超氧化物歧化1抗體(銅/鋅過氧化物歧化SOD)Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat  Mouse IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗小鼠IgM  0.1ml

AFP(Mouse Alpha-fetoprotein) ELISA Kit 小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白 96T

NFX1 核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml

BCL2L15 BCL2樣15促凋亡蛋白抗體 0.2ml

 SOD1 超氧化物歧化1抗體(銅/鋅過氧化物歧化SOD)Multi-class antibodies: 0.1ml

17-OHP(Human 17-Hydroxyprogesterone) ELISA Kit 人17羥孕酮Multi-class antibodies: 48T

 Ly-6G/Gr-1 細(xì)胞抗原6G抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Kinesin 驅(qū)動蛋白KNS1抗體  0.2ml

T3 ELISA Kit 大鼠狀腺原 96T

Proteasome 20S alpha 5 蛋白體PSMα5抗體 0.2ml

CARM1 蛋白精N甲基4抗體 0.1ml

 Ly-6G/Gr-1 細(xì)胞抗原6G抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Donkey  human IgG/PE PE標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml

GCAP1 鳥苷環(huán)化激活蛋白1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ARSB 芳基酯B抗體  0.2ml

 IFABP/FITC 熒光標(biāo)記小腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Monkey IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗猴IgG  2ml

 HSP-70/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記熱休克蛋白70抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
巴爾通體通用探針法熒光定量PCR試劑盒50次潰瘍分枝桿菌種屬: Mycobacterium│ulcerans提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

索氏梭菌種屬: Clostridium│sordellii提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)基: CM0121生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

刺黑烏霉菌種屬: Memnoniella│echinata提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 192生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

白抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒N-乙基順二酰亞 99%5-乙?;?2-氨基-4-甲基噻唑 98%對氨基酚(>98%,BR)

白活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒N-乙基順二酰亞 超純級,99.5%乙4-(二乙氨基)-2-丁炔酯 98%1,4-雙(5-基-2-噁唑基)(>98%,Scint Grade)

白共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒乙二雙(2-氨基乙基)四乙 ARβ-氨甲酯鹽鹽 99%(>98%,BC)

白彈性蛋白(HLE)ELISA試劑盒乙二四乙三鹽 98%4-叔丁基甲 97%氟化(>98%,BR)

白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒乙二四乙三鹽 99%叔丁基 Standard for GC, ≥99.5% (GC)2,5-二基惡唑(>98%,BC)

白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒N-乙基-N-(3-磺基)-3-鈉鹽 98%叔丁基 CP,98%乙鈉(>98%,BR)

白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒乙二四乙二鈉,二 AR,98%叔丁基 99%司班60

白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒乙二四乙二鈉,二 色譜級,≥99.0%叔丁基 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (GC)二氧化鈦(>99%,BR)

白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒乙二四乙二鈉,二 分子生物學(xué)和電泳級,99%4-甲基-2-酮基戊鈣 98%三基(>98%,BR)

白介增強(qiáng)子結(jié)合因子2(ILF2/NF45/PRO3063)ELISA試劑盒乙二四乙二鈉,二 用于植物培養(yǎng),≥99.0%亞氨基二乙二乙酯 98%曲拉通X-405(69.0~71.0%)

白介受體相關(guān)激(IRAK)ELISA試劑盒L-谷肽(氧化型)98%1,1-二-2-基環(huán) 97%尿胰蛋白抑制劑

白介9(IL-9)ELISA試劑盒雙甘肽 99%3,5-二叔丁基 98%氧化鋅(>98%,BC)

白介8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒鹽胍 AR,99.0%4-乙基 99%1,6-己二(>98%,BR)

白介8(IL-8)ELISA試劑盒鹽胍 CP,98.0%2-乙基 98%2,4-二氧基乙鈉(>98%,BR)

白介7(IL-7)ELISA試劑盒異硫胍 ≥99%2-茚酮 98%4(5)-甲基咪唑(>98%,BR)

白介6(IL-6)ELISA試劑盒N-2-哌-N'-2-乙磺鈉鹽 99%L-賴氨乙酯 98%4-氧基乙鈉(>98%,植物級)


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