詳細(xì)介紹
檢測(cè)原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
Rat complement fragment 5A (C5a) ELISA Kit | FS-R4547 |
ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強(qiáng)
4、購(gòu)買本公司的ELISA試劑盒,免費(fèi)代測(cè)
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測(cè)動(dòng)物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動(dòng)脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,科研隊(duì)伍,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
殺珊瑚橙色單胞菌 種屬:Aurantimonas coralicida 分離基物 沉積物/TVG沉積物
深海微桿菌 種屬:Microbacterium profundi 分離基物 沉積物/電視多管采樣
墻壁圣格奧爾根菌 種屬:Georgenia muralis 分離基物 沉積物/TVG沉積物
海假單胞菌 種屬:Pseudomonas pelagia 分離基物 沉積物/TVG沉積物
除烴海桿菌 種屬:Marinobacter hydrocarbonoclasticus 分離基物 沉積物/TVG沉積物
解脂海桿菌 種屬:Marinobacter lipolyticus 分離基物 沉積物/TVG沉積物
海源菌(加詞待譯) 種屬:Idiomarina piscisalsi 分離基物 沉積物/TVG沉積物
鹽單胞菌(加詞待譯) 種屬:Halomonas olivaria 分離基物 沉積物/TVG沉積物
云南微球菌 種屬:Micrococcus yunnanensis 分離基物 沉積物/TVG沉積物
艾霍湖涅斯捷連科氏菌 種屬:Nesterenkonia lacusekhoensis 分離基物 沉積物/TVG沉積物
食物小短桿菌 種屬:Brachybacterium alimentarium 分離基物 其他/法國(guó)Gruyere and Beaufort奶酪表面
新疆涅斯特連科氏菌 種屬:Nesterenkonia xinjiangensis 分離基物 土壤/高鹽土
埃塞俄比亞涅斯特連科氏菌 種屬:Nesterenkonia aethiopica 分離基物 生物樣/污染的羽毛(soiled feather sample)
黃色涅斯特連科氏菌 種屬:Nesterenkonia flava 分離基物 水樣/造紙廠污水
英文名稱:Paenibacillus polymyxa
菌種又名:Bacillus polymyxa
中文名稱:多粘菌
菌種代號(hào):NCIMB 4747 ;NCTC 4747
分離:未知
來(lái)源歷史:<< DCB << Bristol Labs. B-0265 << N. R. Smith 1237
培養(yǎng)基:
3
NUTRIENT AGAR (DIFCO 0001)
Beef extract 3.0 g
Peptone 5.0 g
Agar 15.0 g
Distilled water 1.0 L
Adjust pH to 7.0.
培養(yǎng)條件:30°C
菌種說(shuō)明:
生物安全等級(jí):1
大鼠補(bǔ)體片斷5aELISA檢測(cè)試劑盒Jeotgalicoccus│halotolerans 中文名稱:耐鹽咸海鮮球菌Jeotgalicoccus│halotolerans分離基物:生物樣/海藻培養(yǎng)液提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/藻類共生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:96%
Marinibacillus│campisalis 中文名稱:鹽場(chǎng)海芽孢桿菌Marinibacillus│campisalis分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機(jī)污染物降解菌/多環(huán)芳烴(PAHs)降解菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥98%
Marinococcus│halophilus 中文名稱:嗜鹽海球菌Marinococcus│halophilus分離基物:生物樣/ATHK9301藻液提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:海洋細(xì)菌多樣性研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:511生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Pseudomonas│antarctica 中文名稱:南極假單胞菌Pseudomonas│antarctica提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:微生物/耐冷菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:266生長(zhǎng)條件:15℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Arthrobacr│protophormiae 中文名稱:原玻璃蠅節(jié)桿菌Arthrobacr│protophormiae分離基物:樣/底層海提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:20-25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Bacillus│selenatarsenatis 中文名稱:硒砷芽孢桿菌Bacillus│selenatarsenatis分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:20-25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Nocardiopsis│coralliicola 中文名稱:擬諾卡氏菌(加詞待譯)Nocardiopsis│coralliicola分離基物:沉積物/TVG沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Saccharophagus│sp. 中文名稱:噬糖菌Saccharophagus│sp.分離基物:樣/表層海提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:大洋細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
ELISA試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。