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詳細(xì)介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：禽副粘病毒3型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013448
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
LH/FITC 熒光標(biāo)記抗人促黃體生成抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
STAT3 /FITC 熒光標(biāo)記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AFAP/AFAP-110 微絲相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgG/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
GPKOW G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
STAT3 /FITC 熒光標(biāo)記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
ST(Human Serotonin) ELISA Kit 人血清/血清胺Multi-class antibodies： 48T
PLC beta 3/Phospholipase C beta 3 磷酯Cβ3抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HINT1 組三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
GHRP ELISA Kit 大鼠生長釋放多肽 96T
PTOP 腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常同源蛋白抗體 0.2ml
CYT 19 甲基轉(zhuǎn)移cyt-19抗體 0.2ml
PLC beta 3/Phospholipase C beta 3 磷酯Cβ3抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit rat IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
Gastrin 胃泌/蛙皮抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APNG/MPG N-甲基DNA糖基化 0.2ml
IL-12/FITC 熒光標(biāo)記白介12抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human sIgA/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.5ml
PTEN/MMAC1(NT)/FITC 熒光標(biāo)記一種抑制基因(N端)IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
禽副粘病毒3型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒球形賴氨芽孢桿菌種屬: Lysinibacillus│sphaericus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
釀膿鏈球菌種屬: Streptococcus pyogenes提供形式: 凍干粉安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 哥倫比亞血平板生長條件: 37℃，5%CO2 ，1-2天，乙型溶血，鏡檢為陽性鏈球菌，純
大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 致病菌芯片培養(yǎng)基: 51生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
印度斯坦鏈異壁菌種屬: Streptoalloteichus│hindustanus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0239生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
牛小腸性(CIAP)ELISA試劑盒丁酯 98%4-(氨基)-1-甲基吡唑 98%鹽舍曲林（標(biāo)準(zhǔn)品）
牛兒基焦合(GGPS1)ELISA試劑盒軟脂 standard for GC, ≥99% (GC)(5R)-5-(疊氮甲基)-3-(3-氟基)-2-惡唑酮 98%7-乙基-10-羥基喜樹(SN-38)
因子XIIIB鏈(F13B)ELISA試劑盒軟脂 AR2-氨基-5-溴吡 98%戊鈉
因子XIII A1(F13A1)ELISA試劑盒軟脂 CPS-聯(lián)萘酚 99%戊鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）
因子VIII(FVⅢ)ELISA試劑盒軟脂 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99%(GC)Boc-L-炔基甘氨 98%司帕沙星
因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒軟脂 97%2-溴-4-硝基咪唑 98%司帕沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）
因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒軟脂 99%氨叔丁酯 98%氟喹酮
因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒正戊 GR,99%R-1,1'-聯(lián)-2-萘酚 99%氟喹酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒2-乙 Standard for GC,>99.5%(GC)2-溴芴 97%磺醋酰鈉 SA-NA
因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)ELISA試劑盒2-乙 CP,98%(±)-2,2'-雙-(二膦基)-1,1'-聯(lián)萘 98%磺醋酰鈉 SA-NA（標(biāo)準(zhǔn)品）
因子Ⅷ(FⅧ)ELISA試劑盒2-乙 AR,99%1,1'-聯(lián)-2-萘酚 99%
因子Ⅶ(FⅦ)ELISA試劑盒2-乙 ≥99%, FCC, FG(5S)-N-[3-(4-溴-3-氟基)-2-氧代-5-惡唑基]乙酰 98%
因子Ⅴ(FⅤ)ELISA試劑盒正 GCS,≥99.8% (GC) 2-羥基-5-溴吡 98%（標(biāo)準(zhǔn)品）
因子Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒正 AR,99.0% 雙(2,2,6,6,-四甲基-3,5-庚二酮)鋇 98%替拉替尼
因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒正 CP,98.5% 2--5-甲基吡 98%替拉替尼
原肽段1+2(F1+2)ELISA試劑盒正 for HPLC, ≥99.9%2--4-硝基咪唑 98%鹽特拉唑
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