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細小病毒B19探針法熒光定量PCR試劑盒50次

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更新時間:2022-04-14 13:34:03瀏覽次數(shù):232

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013535 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
細小病毒B19探針法熒光定量PCR試劑盒50次正在出售的產(chǎn)品:黑色素瘤相關(guān)抗原2抗體細胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細胞分析試劑盒
9007-83-4γ-球蛋白(牛)細胞TUNEL顯色法(DAB)測定試劑盒
托木爾假單胞菌冰凍切片TUNEL顯色法(DAB)測定試劑盒
擬南芥MAP65蛋白抗體石蠟切片TUNEL顯色法(DAB)測定試劑盒

詳細介紹

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

細小病毒B19探針法熒光定量PCR試劑盒50次

50次

FS-P013535

 

QQ截圖20201022162313.png 

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

實驗外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建

Human Agrin ELISA Kit 人聚集蛋白Multi-class antibodies: 48T

 SOD2 超氧化物歧化2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat  Mouse IgM whole serum 羊抗小鼠IgM抗血清  1ml

C4a ELISA Kit 大鼠過敏/補體片斷4a 96T

phospho-NIFK (Thr234) 磷化NIFK抗體 0.1ml

BMP11 骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體 0.1ml

 SOD2 超氧化物歧化2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

LBP(Human lipolysaccharide binding protein) ELISA Kit 人脂多糖結(jié)合蛋白Multi-class antibodies: 48T

 TPSB2 肥大細胞類胰蛋白β2Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Junctophilin 4 連接蛋白JPH4抗體  0.2ml

IL-9 ELISA Kit 大鼠白介9 96T

Proteasome 20S beta 3 蛋白體PSMβ3抗體 0.2ml

C4orf29 4號染色體開放閱讀框29抗體 0.2ml

 TPSB2 肥大細胞類胰蛋白β2Multi-class antibodies: 0.1ml

Donkey  human IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的驢抗人IgG 0.1ml

GBP4 G蛋白結(jié)合蛋白4抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ARSA 芳基酯A抗體  0.2ml

 IFI16/p16 /FITC 熒光標記γ干擾誘導(dǎo)蛋白16抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Monkey IgG/Cy7 Cy7標記的兔抗猴IgG  0.1ml

 Phospho-PKR (Thr446) /FITC 熒光標記磷化蛋白激R抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
細小病毒B19探針法熒光定量PCR試劑盒50次Marivitacryptomonadis種屬: Marivitacryptomonadis分離基物: 海洋浮游生物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 102生長條件: 30℃

麥氏交替單胞菌種屬: Alteromonas│macleodii分離基物: 海提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 0442生長條件: 26℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法

牛月形單胞菌種屬: Selenomonas│bovis分離基物: 牛瘤胃提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 1007生長條件: 38℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

摩爾根氏變形桿菌種屬: Proteus│morganii提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 6 9培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

變腎上腺(MN)ELISA試劑盒N-(2-乙?;?-2-亞氨基二乙 BC,99%甲基酯 96%鉛屑(>99%,5N)

鞭毛蛋白(flagellin)ELISA試劑盒2,2′-聯(lián)氨-雙(3-乙基并噻唑啉-6-磺)二鹽 98%5-噻吩-2-磺酰 96%馬來酐(>98%,BC)

臂板蛋白4C(Sema 4C)ELISA試劑盒化乙酰 99%2--4-甲氧基吡啶 99%鹽鹽(>98%,BR)

臂板蛋白3F(S3F)ELISA試劑盒化乙酰 for cell culture,≥992--5-吡啶 98%間二(>98%,BC)

臂板蛋白3A(Sema 3A)ELISA試劑盒N-α-甲酰-DL-精氨酰-4-鹽鹽 98%2,6-吡啶二甲二甲酯 98%粘蛋白

吡哆/吡哆維生B6(PDXP)ELISA試劑盒二(2-)亞氨基三(羥甲基) 99%3,5-二溴-2-羥基吡啶 98%N,N'-二琥珀酰亞基碳酯(>98%,EP)

吡哆/吡哆維生B6激(PDXK)ELISA試劑盒1,3-二[三(羥甲基)甲氨基] 99%1,3-二異喹啉 97%氟化鎳四(>98%,BR)

吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒4-芐基氨基-7-并氧雜惡二唑 99%異乙酯  98%對二鹽鹽(>98%,BC)

吡啶酚(PYD)ELISA試劑盒2,2'-聯(lián)吡啶-4,4'-二甲 96%對羥基甲  97%二氧化硅(>99.9%,BR)

鼻咽癌(NPC)ELISA試劑盒N-甲酰基-L-精氨乙酯鹽鹽 98%4-羥基-3-甲基吡啶 97%氟化鍶(>97%,BR)

諾龍/去(NP)ELISA試劑盒2-溴芴 97%異喹諾酮 98%丁香(>98%,BP)

(LPA)ELISA試劑盒2,2'-聯(lián)喹啉-4,4'-二甲二鈉 98%3-甲基-4-吡啶 98%四氮唑紫(>98%,BS)

本周蛋白(BJP)ELISA試劑盒N,N-雙(2-)甘氨 BC 甲基吡咯-2-羧酯 98%2-甲基吲哚(>97%,BR)

胞質(zhì)動力蛋白(CD)ELISA試劑盒CAPSO單鈉鹽 99%1-甲基咪唑-5-甲 95%硫銨鋁十二(>98%,BR)

胞外超氧化物歧化(SOD3)ELISA試劑盒3-(環(huán)已)-2-羥基-1- 99%對異酯 98%AMP緩沖液(>98%,BR)

胞漿型脂A2-α(cPLA2-α)ELISA試劑盒3-(環(huán)已)-2-羥基-1- 99.5%4-硝基吡唑 97%并咪唑(>98%,BR)
PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。


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