詳細(xì)介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:人乳頭瘤病毒18染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013534
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
lamin A/FITC 熒光標(biāo)記核纖層蛋白A抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SOD2/FITC 熒光超氧化物歧化2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKIRIN2 AKIRIN2蛋白抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
GLUT2 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
SOD2/FITC 熒光超氧化物歧化2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
FEP(Human Free erythrocyte proloporphyrin) ELISA Kit 人游離原卟啉Multi-class antibodies: 48T
Mast Cell Tryptase 肥大細(xì)胞蛋白7抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh JUP/Cateninma γ γ連環(huán)蛋白抗體(Catenin γ , γ鏈接) 0.2ml
MIF ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子 96T
Proteasome 20S beta 6 蛋白體PSMβ6抗體 0.2ml
C4orf21 4號染色體開放閱讀框21抗體 0.2ml
Mast Cell Tryptase 肥大細(xì)胞蛋白7抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey human IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
GBP1 G蛋白結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARRDC4 抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 0.2ml
IFITM1/FITC 熒光標(biāo)記干擾誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
Phospho-PKR (Thr451) /FITC 熒光標(biāo)記磷化蛋白激R抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
人乳頭瘤病毒18染料法熒光定量PCR試劑盒50次傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
側(cè)耳(平菇)種屬: Pleurotus│sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0091生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法
龜分支桿菌龜型亞種種屬: Mycobacterium│Mycobacterium chelonae subsp chelonae提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
堪薩斯分枝桿菌種屬: Mycobacterium│kansasii提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 國際標(biāo)準(zhǔn)菌種,供菌型檢定用培養(yǎng)基: CM0125生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
酮(MGO)ELISA試劑盒碳銀 AR,99.0%1,3-二 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (GC)式碳鎂五(>98%,BC)
二單酰輔A(malonyl CoA)ELISA試劑盒金鈉 金含量,48% 2-氨基-6-吡啶 97%二氧化錳(>97.5%,BC)
二(MDA)ELISA試劑盒銀 銀含量, 77.0 % 2-氨基-4-吡啶 97%1,3-二基脲(>98%,BR)
氨轉(zhuǎn)氨/谷轉(zhuǎn)氨(ALT/GPT)ELISA試劑盒二四氨鈀 Pd ≥43.0%2-氨基-6-甲氧基吡啶 97%聚乙二600
別孕烯酮/3α,5α-四氫孕酮(AP/3α,5α-THP)ELISA試劑盒四氨合化鉑 合物 98%2-溴-6-氨基吡啶 98%普魯士蘭(>98%,BS)
表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒四(三基膦)鈀(0) 99.8% metals basis, Pd 9.0%5-溴噻吩-2-磺酰 97%派洛寧B(Ind)
表皮活化肽因子(CAPF)ELISA試劑盒三基膦化銠 RH 11.1%5-溴噻吩-2-磺酰 97%5-溴-4--3-吲哚基-N-乙酰-beta-D-氨基半乳糖苷
表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白7(EGFL7)ELISA試劑盒蟲草 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%(HPLC)叔丁基異酯 97%巖藻黃質(zhì);褐藻
表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒總銀杏(C13:0,C15:1,C17:2,C15:0,C17:1) ≥90%3-溴-2-基吡啶 98%乙鋇(>99%,BR)
表皮角蛋白(EK)ELISA試劑盒6--1-己 95%3-基異酯 96%甲酐(>99%,BR)
表面膜球蛋白M(mIgM)ELISA試劑盒辛二 99%鄰異酯 98%Brij 58
表面膜球蛋白D(mIgD)ELISA試劑盒辛二 99%間異酯 98%硫鈷七(>99%,BR)
表面膜球蛋白A(mIgA)ELISA試劑盒N-氨酰甲基乙磺 99%環(huán)己基異酯 98%二硫代乙酰(>98%,BR)
表面活性蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒4-氨基-3-肼基-5-巰基-1,2,5-三唑(用于的測定) 99%4--2-吡啶甲 98%脫氧核糖核 II
表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒瓊脂糖 for biochemistry 4-吡啶-2-甲甲酯 98%高粘度纖維
表達(dá)于SiSo系的受體結(jié)合型腫瘤抗原(RCAS1)ELISA試劑盒3-氨基-9-乙基咔唑 95%5-噻吩-2-磺酰 97%L-天冬氨鈉一