詳細介紹
服務流程:
1、根據(jù)客戶提供的基因序列設計特異性引物和熒光探針(染料法只需設計引物)
2、抽提DNA、RNA,并對RNA進行逆轉錄
3、實時熒光定量PCR
4、提供完整的實驗結果報告(檢測數(shù)據(jù)、溶解曲線、擴增曲線)
5、返還樣品(引物、RNA和cDNA)
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參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:轉基因品系油菜HCN10 PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
純化線粒體蛋白氧化(羰基化;carbonyl)比色法測定 IMMP2L(Mitochondrial inner membrane protease subunit 2) 20 ul
植物蛋白氧化(羰基化;carbonyl)比色法測定 immunoglobulin kappa 5 mg
冰凍切片蛋白氧化(羰基化;carbonyl)免疫染色測定 IGBP1 100 ul
細胞內蛋白氧化(羰基化;carbonyl)熒光 IMP3(U3 small nucleolar ribonucleoprotein protein IMP3) 100 ul
組織內蛋白氧化(羰基化;carbonyl)熒光 IMPAD1 20 ul
血液蛋白氧化(羰基化;carbonyl)熒光 IMP4 100 ul
體液蛋白氧化(羰基化;carbonyl)熒光 IGF2BP2(insulin-like growth factor 2 mRNA binding protein 2) 1 Kit
純化線粒體蛋白氧化(羰基化;carbonyl)熒光 IGF2BP1(Insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 1) 100 ul
植物蛋白氧化(羰基化;carbonyl)熒光 IMP5 100 ul
蛋白巰基化(S-thiolation)高效液相色譜 (HPLC)分析 IGHD 1 Kit
蛋白巰基化(S-thiolation)同位素法分析 IGKV1-5 100 ul
精氨酸(ARG)氧化高效液相色譜 (HPLC)分析 IGSF8 100 ul
組氨酸(HIS)氧化高效液相色譜 (HPLC)分析 IGSF11 100 ul
亮氨酸(LEUCINE)氧化高效液相色譜 (HPLC)分析 IGSF21 100 ul
蛋氨酸(MET)氧化高效液相色譜 (HPLC)分析 IKZF3 100 ul
丙氨酸(PHE)氧化高效液相色譜 (HPLC)分析 IMMP2L(Mitochondrial inner membrane protease subunit 2) 100 ul
轉基因品系油菜HCN10 PCR試劑盒Glomerla│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk分離基物: 梨果實提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Bacillus│firmus分離基物: 沉積物/表層沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應用領域: 近海細菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Fusarium│oxysporum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產(chǎn)纖維素酶、半纖維素酶,可發(fā)酵己糖、戊糖產(chǎn)生乙醇培養(yǎng)基: 14生長條件: 28℃存儲條件: 定期移植法;其他
Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 遺傳工程培養(yǎng)基: 0033生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Fusarium│oxysporum f. sp. cubense提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 28℃
Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 酒精釀造培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法
Pleurotus│eryngii提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法
Sinorhizobium│miloti分離基物: 根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 2.3% NaCl生長與慶陽苜蓿共生固氮培養(yǎng)基: 0053生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法