特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加) |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
PFK2/PFKFB3 /FITC 熒光標(biāo)記6磷果糖激2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Slc4a7/Nbcn1 /FITC 熒光標(biāo)記碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Alpha-ENaC 鈉通道蛋白α ENaC 0.2ml
Rabbit human IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
GNPNAT1 葡萄糖6-N-乙酰基轉(zhuǎn)移1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.3ml
Slc4a7/Nbcn1 /FITC 熒光標(biāo)記碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
D-LDH(Human D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人D-乳脫氫Multi-class antibodies: 48T
MyD88 髓樣分化蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Importin 9/RanBP9 核蛋白9抗體(Ran結(jié)合蛋白M) 0.2ml
sCD30L ELISA Kit 大鼠可溶性CD30配體 96T
presenilin 1 早老蛋白-1抗體 0.1ml
CCDC64 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64抗體 0.1ml
MyD88 髓樣分化蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Mouse human IgG(3D3)/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml
Glycogen synthase 2 葡萄糖合成2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ATEXPA10 植物延長(zhǎng)蛋白(擬南芥) 1ml
HO-2/FITC 熒光標(biāo)記血紅氧合-2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG-Fc/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
phospho-c-Raf (Ser338) /FITC 熒光標(biāo)記磷化原癌基因c-Raf抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬瘟病毒疫苗株染料法熒光定量RT-PCR試劑盒西唐氏鏈霉菌種屬: Streptomyces│setonii分離基物: 馬鈴薯瘡痂提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0038生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
淤泥假單胞菌種屬: Pseudomonas│caeni分離基物: 厭氧氨氧化反應(yīng)器的污泥提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 820生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
擬粉紅鎖擲孢酵母種屬: Sporidiobolus│pararoseus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain of S. jaonica培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
類(lèi)阿達(dá)青霉種屬: Penicillium│adametzioides分離基物: 土提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: CM0072生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
脂肪去飽和2(FADS2)ELISA試劑盒N-芐基異 97.0%3-氨基, 包含0.1%碳穩(wěn)定劑, 98%鈦鐵試劑(AR)
脂肪去飽和1(FADS1)ELISA試劑盒巴豆 98%鄰氨基對(duì)叔丁基酚 98%鈦鐵試劑(95%)
脂肪合(FASN)ELISA試劑盒巴豆 Standard for GC,≥99.9% (GC)鄰硝基對(duì)叔丁基酚 98%四溴酚酞乙酯鹽
脂肪N(LIPN)ELISA試劑盒巴豆甲酯 98%2,6-二乙基 98%金蓮橙O
脂肪M(LIPM)ELISA試劑盒維生A 98%2,6-二異基 90%四羥基-對(duì)-醌二合物
脂肪K(LIPK)ELISA試劑盒維生A 分析標(biāo)準(zhǔn)品8-羥基喹啉 AR,99.0%對(duì)二甲酚藍(lán)
脂肪J(LIPJ)ELISA試劑盒(S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧 97%5-硝基-8-羥基喹啉 97%鋅試劑(AR)
脂肪I(LIPI)ELISA試劑盒旋光管 PRG-100-E鄰硝基對(duì)甲酚 98%鋅試劑(≥85%(HPLC))
脂肪H(LIPH)ELISA試劑盒甘草 93%2-甲基-6-乙基 98%1,3-二甲基-5-吡唑酮
脂筏特征蛋白2(FLOT2)ELISA試劑盒羥基纖維 I型,粘度:4000mPa.s鄰酚 AR,98%氟啶(標(biāo)準(zhǔn)品)
脂筏特征蛋白1(FLOT1)ELISA試劑盒羥基纖維 I型,粘度:20000mPa.s2-酚 99%氟節(jié)(標(biāo)準(zhǔn)品)
脂蛋白脂(LIPD)ELISA試劑盒羥基纖維 II型,粘度:100mPa.s2-酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.7% (GC)吡脲(標(biāo)準(zhǔn)品)
脂蛋白關(guān)聯(lián)脂A2(LpPLA2)ELISA試劑盒羥基纖維 II型,粘度:400mPa.s2-乙酮 95%氟吡氧乙(標(biāo)準(zhǔn)品)
脂蛋白a(Lpa)ELISA試劑盒羥基纖維 II型,粘度:100000mPa.s5-硝基吲哚 98%麥穗寧(標(biāo)準(zhǔn)品)
正五聚蛋白3(PTX3)ELISA試劑盒甲基纖維 15mPa.s乙酮 CP,98%標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/m,u=6~2%,酮)
正輔因子4(PC4)ELISA試劑盒甲基纖維 400mPa.s烯基縮甘油 99%氟戊菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00mg/ml,基體:甲)