詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:豬鏈球菌2型探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-P013463
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human ox-LDL ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白Multi-class antibodies: 48T
SSTR3 生長抑受體3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgM whole serum 羊抗人IgM抗血清 1ml
CETP ELISA Kit 大鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白 96T
NANOGP8 干細胞轉(zhuǎn)錄因子NANOGP8抗體 0.2ml
BAP31 BAP31蛋白抗體 0.1ml
SSTR3 生長抑受體3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
HDV IgG(Human Hepatitis D virus IgG) ELISA Kit 人丁型肝炎IgGMulti-class antibodies: 48T
Ku-80 DNA修復(fù)Ku-80抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Laminin 1+2 層粘連蛋白1+2抗體 0.1ml
GR- Alpha(Human glucocorticoid receptor- Alpha) ELISA Kit 人糖皮質(zhì)受體α 96T
PTBP1 核糖核結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
Cyclin B3 周期B3抗體 0.2ml
Ku-80 DNA修復(fù)Ku-80抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit pig IgG/APC APC標記的兔抗豬IgG 0.1ml
GPR78 G蛋白偶聯(lián)受體78抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APOE/Apo E2 載脂蛋白E抗體 0.1ml
IL-5R Alpha/CD125/FITC 熒光標記白介-5受體α鏈抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
PS-1/FITC 熒光標記早老蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬鏈球菌2型探針法熒光定量PCR試劑盒分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium cosmeticum提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium parmense提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究存儲條件: 真空冷凍干燥法
龜分支桿菌龜型亞種種屬: Mycobacterium│Mycobacterium chelonae subsp chelonae提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
乙型副傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│paratyphi B提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 1var.3 1,4,5 b 1,2培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
冷球蛋白(CG)ELISA試劑盒雙環(huán)己酮草酰二腙 98.0%間甲酚 >99.0% (GC)塞曲司特/西拉達司/塞拉司特
類粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒溴 AR,99.5%間甲酚 >98.0%(GC)美托拉宗
類粘蛋白(ORM)ELISA試劑盒二硫化碳 ACS, ≥99.9%間甲酚 分析標準品美托拉宗(標準品)
類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒二硫化碳 for HPLC, ≥99.9%2-甲基-3- 98%西地尼布馬來鹽
類肌腱蛋白c(TNC)ELISA試劑盒銅片 AR,99.5% metals basis2-甲基-3- 分析標準品西他列汀
類肌腱蛋白(TN)ELISA試劑盒化鎘 AR,99.5%鹽芐絲肼 98%維達列汀;維格列汀
類固抗體(SCA)ELISA試劑盒次鈣 technical grade二甲硝咪唑 97%維達列汀;維格列汀(標準品)
類風濕因子(RF)ELISA試劑盒線狀氧化銅 AR4-羥基 98%鄰乙酰楊/阿司匹林
類白抗原G(HLA-G)ELISA試劑盒二磺鈉 IND甲硝唑 分析標準品,>99.8%(GC)鄰乙酰楊/阿司匹林(標準品)
類白抗原E(HLA-E)ELISA試劑盒二磺鈉 ≥97.0% (HPLC)甲硝唑 99%奧利司他(發(fā)酵)
類白抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒2,6-二-O-甲基-β-環(huán)糊精 98%2-溴-5-甲基噻吩 95%奧利司他(發(fā)酵)
類白抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒1,2-環(huán)己二四乙(DCTA) AR,97.0%4-溴-2-甲基噻吩 98%鹽尼卡地平
類白抗原A(HLA-A)ELISA試劑盒反式-1.2-環(huán)己二四乙 98%2-乙基噻吩 97%鹽尼卡地平(標準品)
雷帕霉靶蛋白(mTOR)ELISA試劑盒二安替比林 AR2-羥基-5-硝基吡啶 98%維地平丁酯/丁維地平
酪氨酰tRNA合成(YARS)ELISA試劑盒二安替比林 CP2-硫脲嘧啶 98%孟魯司特鈉
酪氨酰DNA二酯1(TDP1)ELISA試劑盒二安替比林 98%2-硫脲嘧啶 分析標準品孟魯司特鈉(標準品)