詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:人乳頭瘤病毒通用PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013531
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
lamin B/FITC 熒光標(biāo)記核纖層蛋白B抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Somatostatin/GRIH /FITC 熒光標(biāo)記生長抑抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKIP 極光激A相互作用蛋白1抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
Gemin 2 運(yùn)動神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
Somatostatin/GRIH /FITC 熒光標(biāo)記生長抑抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Alpha-SCA(Human Alpha-sarcomeric actin) ELISA Kit 人α橫紋肌肌動蛋白Multi-class antibodies: 48T
P63 protein P63 抑制基因抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSD17B6 17-β-羥脫氫6抗體 0.1ml
MMP-9/Gelatinase B ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B 96T
Proteasome 26S S3 蛋白體PSMD3抗體 0.2ml
CTRP5 補(bǔ)體C1q和壞死因子相關(guān)蛋白5抗體 0.2ml
P63 protein P63 抑制基因抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey human IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
GBA3 β葡萄糖苷3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARRDC1 抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml
IFN- Beta/FITC 熒光標(biāo)記抗人干擾-β抗IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/Bio 生物標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
HSP-90 Alpha/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記熱休克蛋白90α抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
人乳頭瘤病毒通用PCR試劑盒50次謝瓦氏曲霉種屬: Aspergillus│chevalieri提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 197生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 Vi 36 9,12,Vi d -培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
刺孢小單孢菌絳紅變種種屬: Micromonosporaechinosporavar.purpureaYan安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)慶大霉培養(yǎng)基: 11,12生長條件: 28-37℃
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒3-羥基氮雜環(huán)丁鹽鹽 97%甲酯 99%2'-脫氧鳥苷-5'-一二鈉鹽(分子生物學(xué)級)
腸病(Enterovirus)ELISA試劑盒鄰羥基基酮 97%甲酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品10%甲溶液
層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)ELISA試劑盒三 99%聚乙烯吡咯酮 平均分子量 58000, K29-32 L-
層粘連蛋白β1(LN-β1)ELISA試劑盒三基 97%聚乙烯吡咯酮 平均分子量 8000, K16-18二甲基脲
層粘連蛋白-5(LN-5)ELISA試劑盒鉑銨 AR聚乙烯吡咯酮 平均分子量 24000, K23-27氧化鎳
層粘連蛋白(LN)ELISA試劑盒亞鉑銨 鉑含量:52.0%聚乙烯吡咯酮 平均分子量 1300000, K88-96 吩
層連蛋白/板層(LN)ELISA試劑盒銥銨 銥含量:43.0%聚乙烯吡咯酮 平均分子量 10000, K13-18 檸檬三一
布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)ELISA試劑盒氧化金 金含量≥88.6 %2- 99%化鍶六
布盧姆綜合征蛋白(BLM)ELISA試劑盒三基膦溴化銠 銠含量, 10.6%N-乙烯基吡咯酮 包含 100 ppm NaOH 穩(wěn)定劑, 99%聚環(huán)氧乙烯月桂酰, 20% 溶液
不透光相關(guān)蛋白(OPAs)ELISA試劑盒鉑 六合物 AR,Pt ≥37.5%甲丁酯 98%硫鈣二
不耐熱腸B亞單位(LTB)ELISA試劑盒鉑,合 AR甲丁酯 99%2'-脫氧胞苷'-5'-(dCMP)
不對稱二甲基精氨(ADMA)ELISA試劑盒金 48~50% Au basis甲丁酯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)DSS(分子生物學(xué)級)
補(bǔ)體因子I(CFI)ELISA試劑盒二亞硝基二氨鉑 59.0%馬來二丁酯 97%氫氧化鋰一
補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1(CFHR1)ELISA試劑盒二二氨鈀 Pd ≥50% 馬來二丁酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)過硫鈉
補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA試劑盒順鉑 Pt, 65%馬來二乙酯 96%腺苷脫氨(15U/mg)
補(bǔ)體因子D(CFD)ELISA試劑盒銥 Ir 35% in HCl富馬二甲酯 97%阿脲