PCNA細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(ICF/FACS法)

PCNA細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(ICF/FACS法)公司*的商品：絲裂原活化蛋白激酶MAP4K6抗體鳥苷 Danshensu
擬南芥MAP65蛋白抗體尿囊素（標(biāo)準(zhǔn)品） Danshensu
神經(jīng)干RNA結(jié)合蛋白Musashi1抗體檸檬苦素，黃柏內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品,橙皮提取) Sodium Danshensu
粘膜粘附分子1抗體檸檬苦素；吳茱萸內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品,吳茱萸提取) Tanshinone I
髓過氧化

產(chǎn)品屬于：

商品介紹：

操作方法

1. 在最適的環(huán)境下培養(yǎng)細(xì)胞。

2. 除去培養(yǎng)液，用PBS 洗一次。

3. 胰蛋白酶處理和收集細(xì)胞，離心，（注意1）保證每管細(xì)胞數(shù)在106 個(gè)。

4. 用0.3 ml PBS 輕輕的重懸細(xì)胞, 然后慢慢加入0.7 ml 預(yù)冷的100%乙醇。用1 ml 玻璃移液管小心的混勻。在4°C 至少1h。（注意2）

5. 沉淀細(xì)胞，*吸去上清。

6. 用150 μl PBS/1 % BSA 洗細(xì)胞2 次。

7. 用100μl 抗體孵育液（0.5% Tween-20/1%BSA/PBS）重懸細(xì)胞，加入1ul PCNA 抗體(1μg/106 cells)，室溫孵育1 小時(shí)。

8. 離心收集細(xì)胞，用150μl1% BSA-PBS 洗2 次。

9. 離心收集細(xì)胞，用50μl 抗體孵育液重懸，加1μl (1.5μg/106 cells) 羊抗鼠IgG-FITC，室溫孵育30 分鐘。離心收集細(xì)胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次。

10. 用含有終濃度為10 μg/ml RNase A 和20μg/ml PI 的0.5 ml PBS（pH7.4）重懸細(xì)胞。

11. 避光使細(xì)胞在室溫下孵育20min 后，離心收集細(xì)胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次后，轉(zhuǎn)移至流式檢測(cè)管中重懸。

12. FACS 檢測(cè)或者儲(chǔ)存于4℃。
培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

載脂蛋白C4(APOC4)elisa試劑盒英文名稱：APOC4 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝500g

載脂蛋白C3(APOC3)elisa試劑盒英文名稱：APOC3 ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝1g

載脂蛋白C1(APOC1)elisa試劑盒英文名稱：APOC1 ELISA Kit芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣1抗體包裝25g

載脂蛋白A4(APOA4)elisa試劑盒英文名稱：APOA4 ELISA Kit癌易感基因復(fù)合物亞基蛋白3抗體包裝5g

載脂蛋白A2(APOA2)elisa試劑盒英文名稱：APOA2 ELISA Kit腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白BAMBI抗體包裝1g

載脂蛋白A1(APOA1)elisa試劑盒英文名稱：APOA1 ELISA KitB淋巴淋巴瘤因子9抗體包裝5g

孕酮(Pg)elisa試劑盒英文名稱：Pg ELISA Kit膽綠素還原酶抗體包裝1g

原肌球調(diào)節(jié)蛋白3(TMOD3)elisa試劑盒英文名稱：TMOD3 ELISA KitBIVM蛋白抗體包裝25g

原鈣黏素15(PCDH15)elisa試劑盒英文名稱：PCDH15 ELISA Kit血型Lewis A抗原抗體包裝5g

誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)elisa試劑盒英文名稱：NOS2 ELISA Kit粘蛋白/巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶3抗體包裝1g

硬脂酰去飽和酶(SCD)elisa試劑盒英文名稱：SCD ELISA KitBloom綜合征相關(guān)蛋白抗體包裝5g

硬骨素(SOST)elisa試劑盒英文名稱：SOST ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體包裝100g

吲哚胺2,3-雙加氧酶2(IDO2)elisa試劑盒英文名稱：IDO2 ELISA Kit磷化非受體性蛋白酪激酶ETK抗體包裝1g

吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)elisa試劑盒英文名稱：IDO ELISA Kit磷化促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體包裝250mg

抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)elisa試劑盒英文名稱：INHBP ELISA KitB淋巴特異性激活OCT結(jié)合蛋白1抗體包裝25g

整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣3蛋白抗體白介素21(IL21)Alectinib (CH5424802; RO5424802; AF802) 是一種有效，選擇性和口服的 ALK 抑制劑，其 IC50 為 1.9 nM，Kd
PCNA細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(ICF/FACS法)異煙

其他4-吡啶羧；吡啶-4-羧；4-吡啶羥；吡啶-4-羥；4-噼啉；4-吡啶甲；吡啶-4-甲；異尼克

英文名稱：COA

其他英文名稱：Isonicotinic acid；4-Pyridinecarboxylic acid；Pyridine-4-carboxylic acid

產(chǎn)品規(guī)格：CP，98%

包裝：100克

CAS號(hào)：55-22-1

C6H5NO2=123.11

級(jí)別：CP

含量：≥98.0%

熔點(diǎn)：≥310℃

氫氧化鈉溶解試驗(yàn)：合格

鐵：≤0.004%

氮含量：5.7～6.0%

鈣含量：8.2～8.6%

重金屬：≤10 ppm

干燥失重：≤5.0%

性狀：針狀結(jié)晶或粉末。味稍甜而后微苦，有吸濕性，對(duì)光敏感。溶于水、甘油和堿溶液，微溶于乙和酮，不溶于。5％水溶液pH7.2～8.0，在無二氧化碳的水中為8.7。熔點(diǎn) 195～196℃(分解)

用途：生化研究。配制組織培養(yǎng)基。營(yíng)養(yǎng)劑

保存：RT，避光

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。