兔肝實質細胞

兔肝實質細胞公司正在出售的產(chǎn)品：人膽管癌細胞；LIXC-127人食管癌細胞；ESXC-006人肺癌細胞；LUXC-158人肺癌細胞；LUXC-0雜交瘤細胞株；MGA7雜交瘤細胞株；3F3雜交瘤細胞株；HX00818APolycomb組環(huán)指蛋白4(PCGF4)ELISA試劑盒Polybromo1蛋白(PBRM1)ELISA試劑盒POLQ樣蛋白解旋(HELQ)ELISA試劑盒Podocin蛋白(PDC

一、細胞基本屬性

 

組織來源：肝

種屬來源：兔

細胞簡介：隨著人們生活水平的提高，飲食習慣的改變，腫瘤發(fā)病率也在不斷的增加，如肝癌、胃癌和大腸癌等明顯增加的趨勢。肝臟作為人體重要的器官，在整個物質代謝過程中具有廣泛而多樣的功能。肝臟也是體內藥物代謝的重要器官，體內復雜的環(huán)境對藥物代謝等的影響是不言而喻的。但是在體研究藥物或其它化學物質在肝細胞代謝的分子機制有一定的困難，因此我們建立體外的原代肝細胞培養(yǎng)模型用于肝細胞分子生物學特征的研究，作為對在體肝臟研究模型的有益補充。采用改良的灌流方法將肝臟中的肝實質細胞分離、純化、體外培養(yǎng)，全面分析原代肝細胞的生長和功能狀態(tài)，為肝細胞分子生物學特征的研究以及新藥對肝臟的作用機制的研究提供更有價值的線索，以更好的解釋藥物作用的機制。

培養(yǎng)基：原代肝實質細胞培養(yǎng)體系

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：上皮樣，多角形細胞

傳代特性：本細胞為終末分化細胞，不要進行擴增培養(yǎng)。

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

兔肝實質細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈上皮樣，多角形細胞，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內；

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

四、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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