Ki67細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(ICF/FACS法)

Ki67細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(ICF/FACS法)正在出售的產(chǎn)品：絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白2抗體番茄苷 Fusidine
絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白3抗體番茄紅素（標(biāo)準(zhǔn)品） 3-Iodo-L-tyrosine
磷化末端激酶1/2/3抗體番茄（標(biāo)準(zhǔn)品） Dess-Martin periodinane
磷化蛋白質(zhì)酪激酶JAK-1抗體番石榴苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Cidofovir
末端激酶2抗體番石榴葉

操作規(guī)程：

1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)

中文名稱：Ki67細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(ICF/FACS法)

英文名稱：Ki67 cell proliferation Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格：20T

發(fā)貨周期：1～3天

操作方法

1. 在最適的環(huán)境下培養(yǎng)細(xì)胞。

2. 除去培養(yǎng)液，用PBS 洗一次。

3. 胰蛋白酶處理和收集細(xì)胞，離心，（注意1）保證每管細(xì)胞數(shù)在106 個(gè)。

4. 用0.3 ml PBS 輕輕的重懸細(xì)胞, 然后慢慢加入0.7 ml 預(yù)冷的100%乙醇。用1 ml 玻璃移液管小心的混勻。在4°C 至少1h。（注意2）

5. 沉淀細(xì)胞，*吸去上清。

6. 用150 μl PBS/1 % BSA 洗細(xì)胞2 次。

7. 用100μl 抗體孵育液（0.5% Tween-20/1%BSA/PBS）重懸細(xì)胞，加入1ul Ki67 抗體(1μg/106 cells)，室溫孵育1 小時(shí)。

8. 離心收集細(xì)胞，用150μl1% BSA-PBS 洗2 次。

9. 離心收集細(xì)胞，用50μl 抗體孵育液重懸，加1μl (1.5μg/106 cells) 羊抗鼠IgG-FITC，室溫孵育30 分鐘。離心收集細(xì)胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次。

10. 用含有終濃度為10 μg/ml RNase A 和20μg/ml PI 的0.5 ml PBS（pH7.4）重懸細(xì)胞。

11. 避光使細(xì)胞在室溫下孵育20min 后，離心收集細(xì)胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次后，轉(zhuǎn)移至流式檢測(cè)管中重懸。

12. FACS 檢測(cè)或者儲(chǔ)存于4℃。
注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性，則測(cè)定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè)，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

抑制素βE(INHβE)elisa試劑盒英文名稱：INHβE ELISA Kit核糖體合成蛋白BOP1抗體包裝5g

抑制素βC(INHβC)elisa試劑盒英文名稱：INHβC ELISA Kit調(diào)節(jié)中心體分離早期相關(guān)激酶BORA抗體包裝1g

抑制素βB(INHβB)elisa試劑盒英文名稱：INHβB ELISA Kit萊姆病螺旋體抗體包裝5g

抑制素βA(INHβA)elisa試劑盒英文名稱：INHβA ELISA Kit成熟相關(guān)蛋白BOULE抗體包裝5mg

異戊烯半胱氧化酶1(PCYOX1)elisa試劑盒英文名稱：PCYOX1 ELISA Kit伸長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白抗體包裝100ml

乙酰羧化酶α(ACACα)elisa試劑盒英文名稱：ACACα ELISA Kit特異性堿性蛋白Y2抗體包裝25ml

乙脫氫酶7(ADH7)elisa試劑盒英文名稱：ADH7 ELISA Kit癌易感基因2相關(guān)蛋白抗體包裝1mg

乙脫氫酶1(ADH1)elisa試劑盒英文名稱：ADH1 ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝1g

胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4)elisa試劑盒英文名稱：REG4 ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝5g

胰高血糖素樣肽1受體(GLP1R)elisa試劑盒英文名稱：GLP1R ELISA Kit磷化上皮鈣粘附分子抗體包裝100g

胰高血糖素樣肽1(GLP1)elisa試劑盒英文名稱：GLP1 ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝25g

胰多肽(PP)elisa試劑盒英文名稱：PP ELISA KitBRD2蛋白抗體包裝500g

胰淀素(IAPP)elisa試劑盒英文名稱：IAPP ELISA KitBRD3蛋白抗體包裝5g

胰淀粉酶α2(AMY2)elisa試劑盒英文名稱：AMY2 ELISA Kit磷化酪蛋白激酶6/腫瘤激酶抗體包裝1g

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7)elisa試劑盒英文名稱：IGFBP7 ELISA Kit磷化蛋白酪激酶ATK抗體包裝250mg

去整合素樣金屬蛋白酶20抗體白介素21(IL21)Binimetinib (MEK162, ARRY-162, ARRY-438162) is a potent inhibitor of MEK1/2 with
Ki67細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(ICF/FACS法)

其他異煙酰肼；雷米風(fēng)；利抓哉；γ-吡啶甲酰肼；4-吡啶乙酰肼；吡啶-4-甲酰肼；4-吡啶羧肼；4-吡啶甲酰肼；雷米封；

英文名稱：INAH

其他英文名稱：Isonicotinic acid hydrazide；Isoniazid； Pyridine-4-carbohydrazide

產(chǎn)品規(guī)格：BR，98%

包裝：100克

CAS號(hào)：54-85-3

C6H7N3O=137.1

級(jí)別：BR

含量：≥98.0%

PH：6.8～8.0

熔點(diǎn)：171.2～172.5℃

重金屬：≤10ppm

用途：生化研究。晶狀體醛糖還原酶的抑制劑。也用作食品抗氧劑和色素

保存：RT，避光