詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:口蹄疫病毒通用RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-P013450
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
TPO(Rat Thrombopoietin,TPO )ELISA kit 大鼠血小板生成Multi-class antibodies: 48T
STAT2 信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgG/PE PE標記的羊抗人IgG 0.1ml
Alpha1-AGP ELISA Kit 大鼠α1性糖蛋白 96T
NEURL 環(huán)指蛋白67抗體 0.2ml
phospho-Bcl-xL (Thr115) 磷化Bcl-xL蛋白抗體 0.1ml
STAT2 信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
PKB(Human protein kinase B) ELISA Kit 人蛋白激BMulti-class antibodies: 48T
Phospho-Nur77 (Ser351) 磷化孤兒核受體蛋白Nur77抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11 干擾α11抗體 0.2ml
TPA ELISA Kit 大鼠組織多肽抗原 96T
PTK6 酪蛋白激6/激抗體 0.2ml
CREB3L3 環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白H抗體 0.2ml
Phospho-Nur77 (Ser351) 磷化孤兒核受體蛋白Nur77抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit rat IgM/FITC FITC標記的兔抗大鼠IgM 0.3ml
GDNF 膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APOA1 載脂蛋白A1抗體 0.1ml
IL-10R Beta/IL10RB/CDw210b/FITC 熒光標記白細胞介-10受體β抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human sIgA/PE PE標記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
PSP/FITC 熒光標記抗PSP抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
口蹄疫病毒通用RT-PCR試劑盒假腸膜明串珠菌種屬: Leuconostoc│pseudomesenteroides提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0033生長條件: 26℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
藤黃紫假交替單胞菌種屬: Pseudoalteromonas│luteoviolacea提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0223生長條件: 26℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
釀酒酵母種屬: SaccharomycescerevisiaeHansen安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀造果酒培養(yǎng)基: 51生長條件: 28-30℃
曲霉種屬: Aspergillus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 192生長條件: 24-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
尿微量白蛋白(MAU)ELISA試劑盒鐿粉 99.9%1H-吡唑-3- 98%PD 173074
尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒茜紅 AR,≥80.0%(HPLC)2,2,2-三 98%PH-797804
尿相關(guān)蛋白C(UreC)ELISA試劑盒茜黃GG IND二叔戊酰 98%KC-5103
尿嘧啶核苷化1(UPP1)ELISA試劑盒茜黃R AR雙(2,2,6,6,-四甲基-3,5-庚二酮)銅 99%鹽伐昔洛韋/鹽萬乃洛韋
尿激型纖溶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒藍6B IND(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮)釔 99%鹽伐昔洛韋/鹽萬乃洛韋(標準品)
尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒天青I Biological stain烯 AR,>99%(GC),包含180-200 ppm MEHQ 穩(wěn)定劑維庫
尿激型纖溶原激活物(uPA/PLAU)ELISA試劑盒天青I 94%烯, GR,>99.5%(GC)維庫(標準品)
尿激型纖溶原激活物(uPA)ELISA試劑盒天青Ⅱ Biological stain烯丁酯 AR,99%硫長春地辛
尿激型纖溶原激活劑受體(uPAR)ELISA試劑盒天青Ⅱ AR烯丁酯 CP,98%扎西他濱,2',3'-二脫氧胞苷
尿激(UK)ELISA試劑盒鋁試劑 AR乙烯 CP,含10-15ppm 4-叔-丁基鄰二酚穩(wěn)定劑玉米核苷
尿肌酐(UCR)ELISA試劑盒性鉻藍K AR乙烯 99%,含10-15ppm 4-叔-丁基鄰二酚穩(wěn)定劑齊留通
尿苷二葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移(UGCG)ELISA試劑盒對氨基-N,N-二乙基硫鹽 AR,98%乙乙烯酯 CP,98%齊留通(標準品)
尿苷二葡萄糖轉(zhuǎn)移2(UGT2)ELISA試劑盒性品紅 Indicator,pH 1.0-3.1二硫化鉬 AR,99%依諾沙星(溶性)
尿苷二葡萄糖轉(zhuǎn)移1(UGT1)ELISA試劑盒燦爛綠 AR二硫化鎢 99.9%氧氟沙星
尿蛋白(UP)ELISA試劑盒溴甲酚綠 indicator (pH 3.8-5.4) 生物冰袋,500g/袋,190*120*20mm氧氟沙星(標準品)
尿17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)ELISA試劑盒溴百里香酚藍 ACS, Dye content 95 %特丁硫 分析標準品(劇品)阿巴卡韋