培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
喜樹堿溶液(5mM) | Camptothecin (5mM) | 400μl | 1~3天 |
商品介紹:
喜樹堿(Camptothecin,CPT),從Camptotheca acuminata(Camptotheca,喜樹)的樹皮和樹干中分離到的一種類生物堿,呈現(xiàn)出抗白血病和腫瘤特性。喜樹堿是一種有效的拓?fù)洚悩?gòu)酶I(Topoisomerase I, Topo I)抑制劑,不可逆結(jié)合DNA-Topo I復(fù)合物,抑制Topo I切割后DNA的重新結(jié)合,并且以共價連接DNA的方式固定化酶。該酶復(fù)合物隨后發(fā)生泛素化并被26S蛋白酶體破壞,最終將胞內(nèi)拓?fù)洚悩?gòu)酶消耗殆盡。低濃度的喜樹堿可停滯細(xì)胞周期在S期,并以細(xì)胞周期依賴或者非依賴的方式誘導(dǎo)大量正?;虬┳兗?xì)胞發(fā)生凋亡。 |
喜樹堿常被用來誘導(dǎo)并建立細(xì)胞凋亡模型,其在體外按照劑量依賴的表現(xiàn)誘導(dǎo)凋亡發(fā)生。本品以溶于DMSO的母液形式提供,濃度為5mM,只需加入細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋到需要的工作濃度即可,操作簡單方便。
英文別名:(+)-camptothecin;(S)-camptothecin;21,22-Secocamptothecin-21-oic acid; lactone 20(S)-camptothecin; (S)-(+)-camptothecin; NSC100880;
CAS:7689-03-4
分子式:C20H16N2O4
分子量:348.36
純度:>98 %
儲存條件:-20℃,有效期一年
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
輕肽鐵蛋白(FTL)elisa試劑盒英文名稱:FTL ELISA Kit1號染色體開放閱讀框220抗體包裝5g
輕肽神經(jīng)絲蛋白(NEFL)elisa試劑盒英文名稱:NEFL ELISA Kit鈣磷蛋白1抗體包裝1g
親環(huán)B(CYPB)elisa試劑盒英文名稱:CYPB ELISA Kit鈣磷蛋白2抗體包裝25mg
親環(huán)A(CYPA)elisa試劑盒英文名稱:CYPA ELISA Kit磷化通道相互作用蛋白3抗體包裝1g
鞘磷脂(SPH)elisa試劑盒英文名稱:SPH ELISA Kit16號染色體開放閱讀框61抗體包裝250mg
鞘1磷酯受體1(S1PR1)elisa試劑盒英文名稱:S1PR1 ELISA Kit視錐感光環(huán)磷鳥苷門控通道蛋白CNG3抗體包裝5g
鞘1磷酯裂解1(SGPL1)elisa試劑盒英文名稱:SGPL1 ELISA Kit環(huán)核苷門控陽離子通道蛋白β3/CNG-β3抗體包裝1g
橋粒芯膠粘蛋白1(DSC1)elisa試劑盒英文名稱:DSC1 ELISA Kit非受體酪激c-Abl抗體包裝100MG
強啡肽(Dyn)elisa試劑盒英文名稱:Dyn ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白152抗體包裝100MG
前腦啡肽(PENK)elisa試劑盒英文名稱:PENK ELISA Kit甘油二酯膽堿磷轉(zhuǎn)移抗體包裝25mg
前列腺性磷(ACP3)elisa試劑盒英文名稱:ACP3 ELISA Kit嗜鉻粒B抗體包裝1g
前列腺E受體2(EP2)elisa試劑盒英文名稱:EP2 ELISA Kit血管加壓激活鈣啟動受體蛋白1抗體包裝5g
前列腺E合2(PTGES2)elisa試劑盒英文名稱:PTGES2 ELISA Kit色P450Ⅱj3抗體包裝1g
前膠原C端蛋白增強子1(PCPE1)elisa試劑盒英文名稱:PCPE1 ELISA Kit鈣激活離子通道4抗體包裝250mg
前動力蛋白受體1(PKR1)elisa試劑盒英文名稱:PKR1 ELISA Kit周期依賴性激6抗體包裝5g
炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質(zhì)量規(guī)格:> 98%,合物標(biāo)準(zhǔn)品腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子試劑盒紫草苷;Lithosprmoside
拘櫞桿菌Citrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98.5%,BR,二合物腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3試劑盒豬去氧膽;Hyodeoxycholic
: F536資源名稱: 黃曲霉 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98%腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體2試劑盒竹節(jié)香附A;Raddeanin(Ane
喜樹堿溶液(5mM)乙鈰
其他 醋鈰;醋鈰(III);醋鈰(III)水合物;醋亞鈰;乙鈰(III);乙亞鈰
英文名稱: Cerium(III) acetate hydrate
其他英文名稱: Cerium Acetate
產(chǎn)品規(guī)格: AR,99.9%
包 裝: 25克/100克/500克
CAS號:206996-60-3
(CH3CO2)3Ce•xH2O=317.25 (anhydrous basis)
級別:AR
含量:≥99.9%(REO)
性狀:無色晶體,極易潮解,易溶于水。
用途:生化研究。用于化學(xué)工業(yè)添加劑、催化劑。用于汽車尾氣凈化
保存:RT