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羅斯肉瘤病毒RT-PCR試劑盒

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更新時間:2022-04-14 11:24:50瀏覽次數(shù):221

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013464 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
羅斯肉瘤病毒RT-PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:藤黃節(jié)桿菌動物硬組織活性線粒體分離試劑盒
雜交瘤細(xì)胞株;FABP 4C2動物硬組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒
57-00-1無水肌酸純化線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒
2419-94-5BOC-L-谷氨酸活體細(xì)胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

羅斯肉瘤病毒RT-PCR試劑盒

50次

FS-P013464

 

QQ截圖20201022162313.png 

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

Human keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 人角化細(xì)胞因子Multi-class antibodies: 48T

 SSTR2 生長抑受體2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat  human IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗人IgM  0.1ml

eNOS(Mouse Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成 96T

NAIP 神經(jīng)細(xì)胞凋亡抑制蛋白抗體 0.2ml

BCAT2 支鏈基轉(zhuǎn)2抗體 0.1ml

 SSTR2 生長抑受體2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

sRANKL(Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand) ELISA Kit 人可溶性核因子κB受體活化因子配基Multi-class antibodies: 48T

 Moesin 膜突蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Integrin Alpha V + Beta 6 整合αVβ6抗體  0.2ml

IL-12/P40 ELISA Kit 大鼠白介12 96T

PSRC1 富含脯/絲卷曲螺旋蛋白1抗體 0.2ml

CD59 細(xì)胞抗原Ly6c抗體 0.2ml

 Moesin 膜突蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  pig IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml

GIG8 DNA結(jié)合抑制因子2抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh APOE3 載脂蛋白E3抗體  0.2ml

 IL-5/FITC 熒光標(biāo)記白介5抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  MG IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG  0.1ml

 PS-1/FITC 熒光標(biāo)記早老蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
羅斯肉瘤病毒RT-PCR試劑盒大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 312生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

金黃色葡萄球菌金黃亞種種屬: Staphylococcus│aureus subsp. aureus提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 檢測用菌。培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

阿麥斯福特沙門氏菌種屬: Salmonella│amersfoort提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 6,7 d e,n,x培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 定期移植法

酪氨羥化(TH)ELISA試劑盒二乙烯三五乙  CP噻吩-2-羧 99%β-葡聚糖

酪氨激2(Tyk-2)ELISA試劑盒2,6-二酚靛鈉鹽 AR2-噻吩乙酰 98%2-脫氧-L-胸苷/替比夫定

酪氨蛋白激受體TYRO3(TYRO3)ELISA試劑盒N,N-二甲基對二 AR,環(huán)保試劑,96%3-噻吩甲 98%替比夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)

狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)ELISA試劑盒二氨基脲 AR富勒烯C70 99%輪環(huán)藤寧/1,4,7,10- 四氮雜環(huán)十二

蘭尼受體2(RYR2)ELISA試劑盒二氨基脲 ACS富勒烯C70 98%雷替曲塞

賴氨酰氧化(LOX)ELISA試劑盒二氨基脲 98%富勒烯C60 99.9%L-鳥氨 L-天門冬氨鹽

賴氨特異性脫甲基5A(JARID1A)ELISA試劑盒3,5-二 98%富勒烯C70 99%雙嘧達(dá)莫

萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒2,6-二溴酚靛酚鈉 AR富勒烯C60 99.9%他米巴羅汀

NADH脫氫1(NQO1)ELISA試劑盒異辛 standard for GC, ≥99.5% (GC)黃色氧化鉛 99.999% metals basis文多靈

跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員11(MS4A11)ELISA試劑盒異辛 AR2-氨基-3,4-二甲 98%羅丹明B;玫瑰紅B

空泡相關(guān)蛋白A(VacA)ELISA試劑盒異辛 CP反式-(1R,2R)-2-氨基環(huán)戊鹽鹽 97%頭孢哌酮;頭孢哌酮

空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒異辛  >99.0%(GC)反式-(1S,2S)-2-氨基環(huán)戊鹽鹽 98%頭孢哌酮(標(biāo)準(zhǔn)品)

克雷白氏桿菌(klebsiella)ELISA試劑盒異辛 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%順式-(1R,2S)-2-氨基環(huán)戊鹽鹽 98%異硫羅丹明B

克拉拉蛋白(CC16)ELISA試劑盒甲乙酯 GCS,>99.5%(GC)3-氨基巴豆甲酯 97%羅丹明6G/性紅1/玫瑰紅6G

可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISA試劑盒甲乙酯 AR,99%(S)-3-氨基-1,2- 98%麗絲羅丹明B/性紅52/磺酰羅丹明B

可溶性腫瘤壞死因子樣凋亡弱誘導(dǎo)因(sTweak)ELISA試劑盒甲乙酯 CP,98%3-氨基-2-己內(nèi)酰 97%麗絲羅丹明B/性紅52/磺酰羅丹明B


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