中文名稱:CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒
英文名稱:CFSE Cell Proliferation and Tracking Kit
產(chǎn)品規(guī)格:2000T
發(fā)貨周期:1~3天
CFSE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒是基于一種新型熒光探針CFDA SE的用于細(xì)胞增殖檢測和細(xì)胞熒光示蹤的檢測試劑盒。CFDA SE目前被廣泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine摻入等其它細(xì)胞增殖檢測方法。
基于CFDA SE熒光標(biāo)記的細(xì)胞增殖檢測和[3H]-thymidine摻入、BrdU標(biāo)記獲得的檢測結(jié)果*一致,但同時可以提供更多的細(xì)胞增殖信息。使用CFDA SE檢測可以提供整個細(xì)胞群中有多少比例的細(xì)胞分裂了1次、2次或更多次數(shù),同時如果和其它熒光探針聯(lián)用,可以獲取不同分裂次數(shù)細(xì)胞的其它相關(guān)信息。 |
CFDA SE 的全稱為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,分子式為C29H19NO11,分子量為557.47。CFDA SE可以通透細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶發(fā)性地(spontaneously)并不可逆地和細(xì)胞內(nèi)蛋白的Lysine殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng),并標(biāo)記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時,即可充分標(biāo)記細(xì)胞。被CFDA SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定,穩(wěn)定標(biāo)記的時間可達(dá)數(shù)個月。CFSE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,比以前使用的其它細(xì)胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均勻。
由于CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定,每分裂一次子代細(xì)胞的熒光會減弱一半,這樣通過流式細(xì)胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細(xì)胞,分裂一次的細(xì)胞(1/2的熒光強(qiáng)度),分離兩次的細(xì)胞(1/4的熒光強(qiáng)度),分裂三次的細(xì)胞(1/8的熒光強(qiáng)度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細(xì)胞。
CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測。常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測,也可以用于成纖維細(xì)胞、NK細(xì)胞等其它細(xì)胞的增殖檢測,甚至還可以用于細(xì)菌增殖的檢測。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)elisa試劑盒英文名稱:TNNT2 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框62抗體包裝1g
心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)elisa試劑盒英文名稱:TNNI3 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框64抗體包裝1g
小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)elisa試劑盒英文名稱:SNRPD1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框66抗體包裝5g
硝基酪(NT)elisa試劑盒英文名稱:NT ELISA Kit9號染色體開放閱讀框68抗體包裝25g
腺苷環(huán)化酶10(ADCY10)elisa試劑盒英文名稱:ADCY10 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框7抗體包裝5g
腺苷A2b受體(ADORA2b)elisa試劑盒英文名稱:ADORA2b ELISA Kit9號染色體開放閱讀框71抗體包裝1g
線粒體轉(zhuǎn)錄因子A(TFAM)elisa試劑盒英文名稱:TFAM ELISA KitK-酪蛋白抗體包裝250mg
線粒體乙醛脫氫酶(ALDM)elisa試劑盒英文名稱:ALDM ELISA Kit20號染色體開放閱讀框26抗體包裝100g
線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)elisa試劑盒英文名稱:UCP1 ELISA KitC2CD4D蛋白抗體包裝25g
線粒體肌激酶1A(CKMT1A)elisa試劑盒英文名稱:CKMT1A ELISA Kit二硫鍵氧化還原酶鋅指蛋白5抗體包裝1g
纖維介素蛋白(FGL2)elisa試劑盒英文名稱:FGL2 ELISA KitL-型電壓依賴型鈣通道β抗體包裝1g
纖維膠凝蛋白1(FCN1)elisa試劑盒英文名稱:FCN1 ELISA Kit過氧化氫酶抗體包裝5g
纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)elisa試劑盒英文名稱:FGL1 ELISA Kit色素P450 2C19抗體包裝1g
纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)elisa試劑盒英文名稱:FDP ELISA Kit心肌特異性肌鈣蛋白T抗體包裝25g
纖維蛋白原β(FGβ)elisa試劑盒英文名稱:FGβ ELISA KitCD161抗體包裝5g
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A試劑盒乙肝表面(HBs)抗體血漿品
苜蓿中華根瘤菌Sinorhizobium│meliloti 質(zhì)量規(guī)格:BR,>99%,培養(yǎng)級組織多肽特異性抗原試劑盒乙肝表面(HBs)抗體免疫球蛋白
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品組織多肽抗原試劑盒抗A,(單克隆抗體)
CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒異基-β-D-硫代半乳糖苷
其他異基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷;異基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖甙;1-甲基乙基-β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷
英文名稱:IPTG
其他英文名稱:Isopropyl-β-D-thiogalactoside;Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside
產(chǎn)品規(guī)格:超純,99%
包裝:1克/5克/25克/100克/500克
產(chǎn)品規(guī)格:超純,50mg/ml
包裝:5毫升
CAS號:367-93-1
C9H18O5S=238.3
熔點:187~193℃
性狀:淺灰色結(jié)晶或粉末。有吸濕性,易溶于水(0.1g/ml),微溶于乙
用途:生化研究。親和色譜法中用于離解伴刀豆球蛋白A糖蛋白絡(luò)合物的洗脫劑。結(jié)合抗生物素蛋白至內(nèi)源性凝集素上
保存:RT
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)