商品介紹:
XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒是應(yīng)用二甲氧唑黃2,3-bis[2-methoxy -4-nitro-5-sμlfophenyl]-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-tetrazolium hydroxide快速高靈敏度檢測細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的比色檢測產(chǎn)品。
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XTT在電子耦合試劑存在的情況下能夠被線粒體內(nèi)的一些與輔酶Ⅱ相關(guān)的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan,生成的Formazan量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)量呈線性關(guān)系。
本XTT試劑為配制好的即用型試劑,直接加入到細(xì)胞樣品中,不需要預(yù)配各種成分,XTT試劑很穩(wěn)定,對細(xì)胞沒有毒性,可以長時間孵育細(xì)胞。XTT 法測定細(xì)胞增殖或毒性試驗中活細(xì)胞數(shù)目的靈敏度高,無放射性,檢測細(xì)胞增殖實驗的靈敏度比其它方法如MTT高。
儲存條件:2-8℃避光保存。長期存放-20℃避光保存。
注意:
1.XTT試劑短期存放于2-8℃,長期存放請分裝后-20℃避光保存。
2.避免反復(fù)凍融。
3.凍存后溶解時注意重新混勻。
有效期:一年。
產(chǎn)品屬于:
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
L-腎上腺(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sumatriptan succinate 順鉑耐藥相關(guān)蛋白9抗體包裝5g
L-絲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Streptomycin Sulphate22號染色體開放閱讀框40抗體包裝1g
L-天門冬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Streptomycin Sulphate嗜粒趨化蛋白3抗體包裝1g
L-巖藻糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dihydrostreptomycin Sulphate21號染色體開放閱讀框33抗體包裝250mg
L-異亮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Diclofenac sodium角蛋白15抗體包裝5ml
Lenalidomide(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Diclofenac sodium角蛋白14抗體包裝1g
Letrozole(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gabapentin神經(jīng)NB3特定蛋白抗體包裝1g
Levonorgestrel(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gabapentin促胃泌受體抗體包裝5g
Loperamide HCl(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Domperidone單克隆抗體包裝1g
Losartan Potassium英文名稱: Domperidone2號染色體開放閱讀框72抗體包裝5g
m-酚-4-磺銨(聚酚磺雜質(zhì))(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Niclosamide間粘附分子3抗體包裝1g
m-酚-4,6-二磺銨 (聚酚磺雜質(zhì))(標(biāo)準(zhǔn)品...英文名稱: Niclosamide染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體包裝1g
m-酚-6-磺銨(聚酚磺雜質(zhì))(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ciprofloxacin降鈣抗體包裝25g
MB1120-S英文名稱: Ciprofloxacin降鈣基因相關(guān)肽1型受體抗體包裝5g
Medroxyprogesterone acetate...英文名稱: FamciclovirCD19抗體包裝500mg
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%血漿激肽釋放試劑盒L-纈;L-Valine
: JCM13471資源名稱: DSMZ17855, Type strain 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血漿α顆粒膜蛋白試劑盒香草;4-hydroxy-3-meth
彩色豆馬勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR血紅氧合2試劑盒雪松;Cedrol
XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒氧化
英文名稱: Oxysophoridine
產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%
包 裝: 1克
CAS號:54809-74-4
C15H24N2O2=264.4
級別:BR
含量:≥98.0%
性狀:粗針狀結(jié)晶或大棱柱狀結(jié)晶。是從豆科植物苦豆子中提取的主要生物堿之一
用途:生化研究。
保存:RT